广东不同地区野生或市售五指毛桃中补骨脂素含量的测定
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[摘要] 目的：分析广东不同地区野生或市售五指毛桃的质量。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent Hypersil C18(4.0 mm×250 mm，5 μm)；检测波长245 nm，流动相为乙腈-水(35∶65)；流速为1.0 ml/min。结果：五指毛桃中补骨脂素在16.0～248.0 μg/ml线性关系良好(r＝0.999 2)，平均回收率为102.08%，RSD=2.17%(n=6)。结论：以高效液相色谱法测定五指毛桃中补骨脂素的含量，操作简便，专属性好，可用于五指毛桃的质量控制。
[关键词] 五指毛桃；补骨脂素；含量测定
[中图分类号] R282.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)12(b)-029-02
Determination of psoralen in Radix Fici Hirate from different regions and markets in Guangdong Province
WEN Ling1, WU Hua-bi1, LIU Sha1, LIANG Wei-yan1, YANG Wen-hao1, MA Ji2*
(1. Shunde Polytechnic, Guangdong Province, Foshan528333, China; 2.Southern Medical University, Guangzhou510515，China)
[Abstract] Objective: To analyze the quality of Radix Fici Hirate from different regions and markets in Guangdong Province. Methods: HPLC with Agilent Hypersil C18 column ( 4.0 mm×250 mm, 5 μm) was used, CH3CN-H2O(35∶65) was used as mobile phase with the flow rate of 1.0 ml/min , the detective wavelength was set at 246 nm. Results: A good linearity of psoralen was at the range of 16.0-248.0 μg/ml(r＝0.999 2)，the average recovery was 102.08%，RSD was 2.17% (n=6). Conclusion: This method is simple with strong specificity ,it can be used for the quality control of Radix Fici Hirate.
[Key words] Radix Fici Hirate; Psoralen; Determination
五指毛桃(Radix Fici Hirtae)为岭南著名常用草药之一，且为药食同源植物。其俗名为牛奶木、土黄芪、火龙叶、九龙根等，由《中华人民共和国药典》一部77版收载[1]，以桑科(Moraceae)榕属(Ficus)植物粗叶榕(F. hirta)的根入药，性平，味甘、辛，有健脾补肺、利湿舒筋之功，用于脾虚浮肿、食少无力、肺痨咳嗽、盗汗、风湿痹痛、产后无乳等症。在广东地区，民间常用五指毛桃的根煲汤，称之为“南芪”，应用历史悠久，保健作用广为认可。近年来有关其化学成分、药理活性等方面的研究证实，补骨脂素为五指毛桃的主要活性成分之一，具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制肿瘤，免疫调节等作用[2-7]。为分析广东不同地区野生或市售五指毛桃的质量，采用高效液相色谱法分别对广东不同地区野生五指毛桃根茎叶中补骨脂素的含量和广东不同地区市售或农家自售五指毛桃药材中补骨脂素的含量进行了测定，现报道如下：
1仪器与试药
1.1试药
药材[采集于广东不同地区野生品种(详见表1)或购于广东不同地区市售及农家自售产品(详见表2)，经南方医科大学中医药学院药植鉴定教研室鉴定为粗叶榕Ficis hirta Vahl.，按实验要求，取各部洗净，晾干，干燥后粉碎备用]；补骨脂素对照品(中国药品生物制品检定所，批号110739-200512，供含量测定用)；乙腈为色谱纯，水为超纯水。
1.2仪器
Agilent 1100高效液相色谱仪。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱为Agilent Hypersil C18(4.0 mm×250 mm，5 μm)；检测波长245 nm，流动相为乙腈-水(35∶65)；流速：1.0 ml/min。
2.2对照品溶液的制备
精密称取补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每1 ml含69 μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取五指毛桃供试品粗粉1 g，精密称定，加甲醇10 ml，超声波提取30 min，定容至10 ml，0.45 μm滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。
2.4线性关系考察
精密称取补骨脂素对照品适量，用甲醇准确配制成浓度为16.0、31.0、62.0、124.0、248.0 μg/ml的溶液，进样10 μl，每一浓度进样6次，以峰面积为纵坐标，标准浓度为横坐标，进行线性回归，得补骨脂素标准品回归方程为Y＝158.77X-1.112，r＝0.999 2(n＝6)，线性范围为16.0～248.0 μg/ml。
2.5精密度试验
取62.0 μg/ml的补骨脂素对照品溶液，按上述色谱条件，进样10 μl，连续测定6次，用峰面积计算其含量。结果表明，RSD为1.36%，该方法的精密度良好。
2.6稳定性试验
取同一份供试品溶液，每隔3 h进样一次，共测定8次，结果RSD为1.16%(n=6)，表明供试品溶液在24 h内相对稳定。
2.7回收率试验
精密称取已知含量的五指毛桃粗粉0.5 g，共取6份，分别精密加入补骨脂素对照品，按上述方法分别测定，结果平均回收率为102.08%，RSD=2.17%(n=6)。
2.8样品测定
取供试品溶液和对照品溶液，分别进样10 μl，按外标法计算含量，测定结果见表1，表2。
表1 广东不同地区野生五指毛桃根茎叶的补骨脂素含量
表2 广东不同地区市售或农家自售五指毛桃的补骨脂素含量
3讨论
试验结果表明，广东不同地区野生五指毛桃药材(根)中补骨脂素含量差异较大。其中，以信宜所产者最高，为1.197 6 mg/g，化州所产者最低，为0.385 1 mg/g，这与以往报道所得结果近相一致[2-7] ......
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