玉屏风散对变应性鼻炎肥大细胞释放类胰蛋白酶影响的实验研究
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[摘要] 目的：探讨玉屏风散对变应性鼻炎肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。方法：采用血清药理学和体外细胞培养的方法，研究玉屏风散含药血清体外对变应性鼻炎动物模型中腹腔肥大细胞(RPMC)释放类胰蛋白酶的影响。结果：与空白血清组比较，玉屏风散血清组RPMC释放类胰蛋白酶的量明显降低。结论：玉屏风散体外可抑制变应性鼻炎RPMC脱颗粒释放类胰蛋白酶，可能是该方通过稳定肥大细胞用于治疗变应性鼻炎的相关机制之一。
[关键词] 玉屏风散；变应性鼻炎；类胰蛋白酶；实验研究
[中图分类号] R285.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)02(a)-013-02
Experimental study on YU-Pingfeng San to the tryptase released by mast cells of allergic rhinitis
ZHANG Zhong-lin, ZHONG Ling, ZANG Zhi-he, XIN Zhi-wei
(Pharmacy College of Chengdu Medical College, Chengdu610083, China)
[Abstract] Objective: To investigate the effect of YU-Pingfeng San on the tryptase of allergic rhinitis. Methods: Serum pharmacological and extra-cell culture methods were employed to study the effect of blood serum of YU-Pingfeng San on the tryptase released by rat peritoneal mast cell (RPMC) in allergic rhinitis model rat. Results: Compared with the blank serum group, the content of tryptase of administration serum group decreased remarkably. Conclusion: YU-Pingfeng San can inhibit the RPMC to release tryptase in allergic rhinitis model rat, which is probably one of the mechanism of the prescription to stable mast cells to cure the allergic rhinitis.
[Key words] YU-Pingfeng San; Allergic rhinitis; Tryptase; Experimental study
变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)又称过敏性鼻炎，是已致敏患者再次接触过敏原后，由IgE介导的鼻黏膜超敏反应性疾病。AR是全球性的常见病与多发病，我国每年约有2 000万人患病，10%～40%的世界人口经受AR困扰[1]。肥大细胞(mast cells，MCs)来源于造血干细胞，广泛分布于结缔组织、黏膜组织及血管周围，易接触病原体和变应原等物质从而参与过敏反应的病理过程，MCs被激活而释放出类胰蛋白酶等炎症介质引起过敏反应。玉屏风散是中医的传统经典方剂，出自元·朱丹溪的《丹溪心法》，由黄芪、白术、防风组成，具有益气固表之功，为肺气虚证治疗的传统经典方剂，临床上常用该方或加味治疗AR并取得良好疗效。本研究从MCs脱颗粒释放类胰蛋白酶研究玉屏风散对AR的作用及其作用机制，为临床上应用该方治疗AR提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 主要材料
健康SD大鼠由四川医学科学院动物中心提供；RPMI 1640培养基、胎牛血清均美国Gibco公司提供；α-N-苯甲酰-DL-精氨酸-p-硝基苯酰胺盐酸盐(BAPNA)，二甲基亚砜(DMSO)、Tris-HCl由美国Sigma公司提供；酮替芬由安徽华源医药股份有限公司提供。
1.2 实验分组及模型制作
健康SD大鼠40只，体重180～220 g，随机分为4组：模型组、阳性组、给药组和空白组，每组10只。造模方法参照文献[2],前3组为致敏组，将10% TDI橄榄油溶液用微量移液器滴入豚鼠双侧鼻孔(每侧5 μl)，每天1次，连续用5 d，后改为隔日激发给药1次，直至末次给药后45 min再激发1次；后一组为空白组，仅给生理盐水滴入双侧鼻孔内，每天每侧5 μl，其方法同致敏组。以鼻部症状和体征为主要观察内容。造模成功后，即于第2次激发后(第9天)开始，除空白组外，各组分别给予生理盐水、120%玉屏风散和16%酮替芬10 ml/kg，给药时间为15 d。自给致敏药开始，依据鼻痒、喷嚏、流涕轻重程度、次数多少、出现的时间长短为评分标准并评分记录，参照文献[2]拟定评分标准(表1)。
表1 过敏反应行为学评分
各症状记分叠加，总分5分者为模型成功，其症状观察时间为每次给致敏药后30 min内。
1.3类胰蛋白酶活力测定
取“1.2”实验中的模型组大鼠，按文献[3]方法分离大鼠腹腔肥大细胞(rat peritoneal mast cell, RPMC) ......
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