人工种子在盾叶薯蓣快速繁殖技术中的初步应用(1)
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[摘要] 目的：提高盾叶薯蓣试管苗的移栽成活率。方法：在组织培养的基础上，对盾叶薯蓣人工种子中人工种皮、人工胚乳制作、人工种子一次性成苗及移栽成活率等问题进行了初步研究。结果：人工种子快速繁殖的最适条件为：从盾叶薯蓣愈伤组织表面切取2～3 mm小块茎，包埋在2.5%海藻酸钠中，滴入2% CaCl2中反应8～10 min，人工胚乳MS/2+IAA 0.4 mg/L直接播种在MS/2培养基上，一次性成苗率可达100%左右，移栽成活率高达85%。结论：以组织培养为基础的盾叶薯蓣人工种子快速繁殖技术具有一定的优越性。
[关键词] 盾叶薯蓣；人工种子；快速繁殖技术
[中图分类号] Q94[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)05(a)-030-04
The elementary application of artificial seeds in the technique of rapid multiplication of D.zingibiernsis
XIE Caixia1, CUI Yongxia1, BAI Yan1, BAI Yu2, HU Ya'nan1
(1.Henan College of TCM, Zhengzhou 450008, China; 2.Research Institution of Tianjin Tasly Group, Tianjin 300410, China)
[Abstract] Objective: To improve the survival rate of the plantlets of D.zingiberensis. Methods: On the basis of tissue culture, the technique of artificial endosperm, artificial seeds of D.zingiberensis, the germination ratio of artificial seeds and the survival rate were investigated. Results: The condition of rapid multiplication of artificial seeds should be as following: cutting about 2-3 mm size embryo coming from callus, cultured embryo was encapsulated with 2.5% solidumalginate in IAA 0.4 mg/L solution and then dropped in 2% CaCl2 solution for 8-10 min, artificial seeds were germinated on the MS/2 medium. According to the above procedure, the germination ratio of artificial seeds could reach 100% or so and the survival rate could reach 85%. Conclusion: The technique of rapid multiplication of artificial seeds on the basis of tissue culture of D.zingiberensis has definite superiority.
[Key words] D.zingiberensis; Artificial seeds; Technique of rapid multiplication
自1978年Murashige[1]首次报道人工种子的概念以来，由于其在良种快繁、固定杂种优势、简化育种程序以及与基因工程、脱病毒等技术相结合等方面有着广阔的发展前景[2]而成为当前体细胞胚胎学及遗传学中的一个重要课题。目前，已从200多种植物中诱导出体细胞胚，但进行过人工种子实验的不超过40种[3-4]，这是由于作为人工种子包埋体的植物必须具备高频率、同步化的高质量胚状体发生系统。而1985年Kamada提出的以非体细胞胚为包埋材料的广义人工种子的研究大大扩展了人工种子的应用范围，开辟了人工种子技术的新天地。我国也于1987年列入国家高技术研究与发展计划(“863计划”)；周丽艳等[5]以腋芽为培养物进行甘薯人工种子的研究，薛建平等[6]对半夏的人工种子进行了研究；秦自清等[7]对霍山人工种子包埋繁殖体和萌发进行了研究。可见，人工种子的研究范围从过去的模式植物转向石斛、半夏等具有重要经济价值的粮食作物、观赏植物和药用植物，大大增加了它的应用价值与商业价值。组织培养是目前应用最为广泛的快速繁殖技术，盾叶薯蓣作为薯蓣皂苷元重要的提取原料，其组织培养技术已相对成熟，但由于盾叶薯蓣试管苗田间移栽成活率较低，限制了其快速繁殖技术的广泛应用。基于此，本文在组织培养的基础上，对盾叶薯蓣人工种子中人工种皮、人工胚乳制作，人工种子一次性成苗及移栽成活率等问题进行了初步研究，以期建立更好的快速繁殖方法。
1 仪器与试药
1.1 实验材料
盾叶薯蓣采自江苏省植物所，栽培于中国药科大学实验苗圃，原植物经江苏省植物所丁志遵、秦慧贞老师鉴定为盾叶薯蓣 ......
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