慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液TNF-α、IL-8的检测及临床意义(2)
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禁性欲至少3～5 d，用新洁尔灭消毒尿道外口，排出50～100 ml尿液后留取10 ml尿液，送细菌培养。行膝胸位经直肠前列腺按摩，取前列腺液1 ml置无菌试管中，-20℃保存备用。最后残余部分涂于玻片上行常规镜检。常规镜检由专人完成，以减少人为误差。再次用新洁尔灭消毒尿道外口，留取初段尿10 ml送细菌培养。
1.4 检测方法
检测采用双抗体夹心ABC-ELISA法，人TNF-α、IL-8定量ELISA试剂盒由北京晶美生物有限公司提供，检测严格按试剂盒说明书进行。
1.5 统计学处理
数据以均数±标准差(x±s)表示，白细胞检查采用积分方法统计，(+)/HP为1分。采用SPSS 11.0统计分析软件，计量资料采用t检验，两因素之间相关性分析采用Spearman等级相关和偏相关分析，P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1三组患者EPS中WBC、TNF-α及IL-8检测结果
对于TNF-α水平，ⅢA型组分别与ⅢB型组、对照组比较，有显著性差异(P<0.05)；ⅢB型组与对照组比较，无显著性差异(P>0.05)。对于IL-8水平，ⅢA型组、ⅢB型组分别与对照组比较，有非常显著性差异(P<0.01)；ⅢA型组与ⅢB型组比较，有非常显著性差异(P<0.01)。见表1。
表1EPS中WBC、TNF-α及IL-8检测结果(x±s)
与ⅢB组及对照组比较，△P<0.05，*P<0.01；与对照组比较，※P<0.01
2.2 TNF-α、IL-8水平与WBC计数的相关性分析
IL-8为控制因素时，TNF-α和WBC计数评分的偏相关系数r=-0.167，P>0.05，显示两者无明显相关；TNF-α为控制因素时，IL-8和WBC计数评分的偏相关系数r=0.836，P<0.01，表现为较明显的相关性(表2)。
表2EPS中细胞因子和WBC计数的偏相关分析
3 讨论
根据NIH对慢性前列腺炎新的新分类方法，前列腺炎可分为四型，Ⅲ型前列腺炎的分型标准一直以来都是以EPS中WBC计数作为分型的依据。但男科学的很多辅助检查各项参数受实验方法、操作人员等因素影响，即使是一个患者不同时间采取的前列腺液标本，各项参数也有一定的波动。而且越来越多的证据表明，WBC计数与症状及病情严重程度之间并无关联[1]。因此，对于Ⅲ型前列腺炎的诊断、病程、病情的发展以及治疗效果的判定一直困扰着临床医师。近几年来，研究发现EPS中细胞因子水平与慢性前列腺炎有一定的相关性。慢性前列腺炎患者的前列腺分泌物或精液中可以出现某些细胞因子水平的变化[2]，提示可通过检测EPS中细胞因子的变化，作为慢性前列腺炎的诊断及治疗效果的评价指标，以期寻找一个对慢性前列腺炎分型诊断更特异性的参数。近来，关于感染性和炎症性疾病发病机制的研究，已从原来研究疾病反应中的细胞功能过渡到研究炎症反应应答的调节机制，CNP的症状可能与神经营养因子、神经生长因子引发的神经源性炎症和心理压力引发的生化反应有关，促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子的失衡可能参与了发病机制[3]。已有研究表明，患者的前列腺分泌物或精液中可以导致慢性前列腺炎，发病原因虽然不明了，但免疫学异常是发病的重要原因之一[4]，而细胞因子的变化可以更早、更准确地体现前列腺的炎症状况。组织的炎症是以细胞因子为中介产生的连锁反应，炎症在始动因素(如感染、外伤、免疫因素等)的作用下产生前炎症细胞因子(如TNF-α和IL-1β)，这些细胞因子可增加趋化因子(IL-8和ENA-78)、环加氧酶-2(COX-2)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和细胞黏附分子的表达，引起全身性的炎症反应[5]。抗炎症细胞因子通过抑制前炎症细胞因子的活性来抑制炎症的发展，因此抗炎症细胞因子与前炎症细胞因子间的平衡将影响炎症的过程及转归[6]。CAP/CPPS的病因和发病机制是多方面的，细胞因子在其发生、发展中所起的作用与全身炎症发生的机制也一样，IL-8是一种强效、相对低分子量的炎症趋化因子，主要由单核-巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和多种上皮细胞产生，其主要功能是中性粒细胞的趋化因子，特点是帮助募集中性粒细胞和单核-细胞进入炎症部位和调节白细胞黏附分子的表达[7]，前列腺炎组织局部的中性粒细胞增多进一步引起组织炎症和损伤，国内有研究认为慢性前列腺炎患者IL-8水平升高[8-9]。TNF-α主要来源于活化的单核-巨噬细胞、抗原激活的T细胞和自然杀伤细胞，肥大细胞也分泌TNF，具有介导抗肿瘤以及调节机体免疫功能、参与发热和炎症的发生等作用。在前列腺局部，TNF-α可以激活中性粒细胞和单核-巨噬细胞，刺激它们合成IL-1、IL-6、IL-8和TNF，增加某些黏附分子的表达而促进炎症细胞黏附、游走、浸润及中性粒细胞脱颗粒，同时也通过自分泌方式作用于巨噬细胞本身而释放炎症介质(如白三烯、前列腺素等)促进炎症反应。在许多由感染引起的CPPS病例中，TNF-α可能在随后的宿主防御中起重要作用，发挥抗感染效应。
在实验中，我们发现慢性非细菌性前列腺炎EPS中，ⅢA型组TNF-α水平与ⅢB型组、对照组比较，有显著性差异(P<0.05)；ⅢB型组TNF-α水平与对照组比较，无显著性差异(P>0.05)。ⅢA型组IL-8水平与ⅢB型组、对照组比较，有非常显著性差异(P<0.01)；ⅢB型组与对照组比较，有非常显著性差异(P<0.01)。所有患者EPS中TNF-α水平与WBC计数无明显相关性(r=-0.167，P>0.05)，IL-8水平与WBC计数的相关性分析显示呈正相关(r=0.836，P<0.01)，说明前列腺液TNF-α及IL-8的检测结果有助于区分ⅢA型和ⅢB型慢性前列腺炎，并可作为了解病情、治疗效果评价的一个有价值的指标。
[参考文献]
[1]Nickel JC, Alexander RB, Schaeffer AJ, et al. Leukocytes and bacteria in men with chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome compared to asymptomatic controls [J]. J Urol,2003,170(3):818-822.
[2]Heinlein CA, Chang C. Androgen receptor in prostate cancer [J]. Endocr Rev,2004,25(2):276-308 ......
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