复方莲紫汤对几种肺癌细胞增殖抑制作用
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[摘要] 目的：观察复方莲紫汤对肺癌细胞体外增殖的抑制作用。方法：采用 MTT法，观察不同浓度的复方莲紫汤分别作用24、48、72 h，对 3种人肺癌细胞(A549，NCL-H466，PGCL3)生长增殖的影响。结果：复方莲紫汤用药24、48、72 h对 3种肺癌细胞的生长增殖均有不同程度的抑制作用。复方莲紫汤作用 72 h对3种肺癌细胞株(A549，NCL-H466，PGCL3)的 IC50分别是70.6、176.2、70.2 mg/L。结论：复方莲紫汤能有效抑制肺癌细胞的体外增殖，并且呈时间依赖性和浓度依赖性。
[关键词] 复方莲紫汤；MTT；肺癌
[中图分类号] R273 [文献标识码] B[文章编号]1673-7210(2009)05(b)-104-02
Inhibition of proliferation by Compound Zilian Decoction in three kinds of lung cancer cell lines
DING Ying, FENG Cheng'en
(Guangdong Pharmarceutical College, Guangzhou510006, China)
[Abstract] Objective: To observe the inhibition effect of Compound Zilian Decoction on proliferation of three kinds of lung cancer cell lines in vitro. Methods: After treatment of lung cancer cell lines (A549, NCL-H466 and SPCA-I) with various concentration Compound Zilian Decoction for 24, 48, and 72 hours, the proliferation capacity of cells was observed by MTT.Results: After treated with Compound Zilian Decoction, the proliferation of these lung cancer cell lines were inhibited differently. The IC50 treated after 72 h of A549, NCL-H466, PGCL3 was 70.6, 176.2, 70.2 mg/L. Conclusion: Compound Zilian Decoction could inhibit the proliferation of lung cancer cells effectively in a time- and dose-dependent manner.
[Key words] Compound Zilian Decoction; MTT; Lung cancer
传统医学认为，肿瘤的形成与发展是正邪矛盾双方交争发展变化的过程。一是体内正气相对虚弱，二是邪气对人体的影响，引起人体阴阳平衡失调、脏腑升降功能紊乱、气血运行不畅，造成气滞血瘀、痰凝湿聚、邪毒郁热等一系列的病理变化，最终形成肿瘤[1]。复方莲紫汤是民间用来治疗肿瘤的验方，主要由生黄芪、茯苓、半枝莲、白花蛇舌草、紫苏子、红枣等中药组成，主要功效以扶正祛邪、通利水道为主。为进一步研究其抗肿瘤作用，本文对本方从体外药效学着手研究。
1 材料与方法
1.1 材料
A549，NCL-H466，PGCL3(购自中科院上海细胞所)；复方莲紫汤；RPMI-1640 培养基(Gibco)；小牛血清(杭州四季青工程有限公司)；酶标仪(Bio-rad)，MTT(Sigma) 。
1.2 方法
MTT 法测定复方莲紫汤分别作用24、48、72 h 对A549、 NCL-H466、PGCL3 细胞增殖的影响。分别选取对数生长期A549、NCL-H460、PGCL3细胞，经胰酶消化、台盼蓝染色后在血细胞计数板上计数，确保活细胞在97%以上。调整细胞浓度以2 000 个/孔( 90 μl/孔) 加到96 孔培养板中。将培养板放入37℃、5%CO2 孵箱中培养。待细胞贴壁后取出培养板，加入测试的药物，用药组加入10 μl 不同浓度药物，使其生药的终浓度分别为25、50、100、200、400 mg/L，每个浓度设4 个平行孔，同时设置空白对照组、溶剂对照组和调零孔。培养板放回培养箱中分别继续培养24、48、72 h，取出培养板，每孔加入20 μl MTT(5 mg/ml) ，孵育4 h。吸出上清液，加入150 μl DMSO，在平板摇床振摇10 min，使甲臜完全溶解。于酶标仪上以测定波长为570 nm，参考波长为490 nm，测定其吸光度A值。实验重复3 次。计算细胞增殖抑制率：
1.3 统计学分析
实验数据以(x±s) 表示，采用SPSS 13.0 统计软件包One Way Anova 进行统计学处理。P<0.05 表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1复方莲紫汤对A549 增殖的抑制作用
不同浓度复方莲紫汤(25～400 mg/L)分别作用于A549 细胞24、48、72 h，抑制率呈明显的时间-剂量依赖性(P<0.05)。其作用72 h 后IC50 为70.2 mg/L，见图1。
2.2 复方莲紫汤对NCL-H466 增殖的抑制作用
不同浓度复方莲紫汤(25～400 mg/L)分别作用于NCL- H460细胞24、48、72 h，抑制率呈明显的时间-剂量依赖性(P<0.05) 。其作用72 h 后IC50 为176.2 mg/L， 见图2。
2.3 复方莲紫汤对PGCL3 增殖的抑制作用
不同浓度复方莲紫汤(25～400 mg/L)分别作用于PGCL3细胞24、48、72 h， 抑制率呈明显的时间-剂量依赖性(P<0.05)。其作用72 h 后IC50 为70.2 mg/L， 见图3。
3 讨论
肺癌在20 世纪末已成为各种癌症死亡的首要病种，目前其发病率仍呈上升趋势。目前已证明吸烟、酗酒等不良的生活习惯以及环境污染是肺癌发生的危险因素[2]。中国是烟草生产和消费大国，拥有为数众多的烟民，因此肺癌的发病率在中国居高不下。由于现有治疗肺癌的化疗药物尽管能杀死肿瘤细胞 ......
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