重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应条件的研究
对甲苯磺酸钠,反应时间,中试放大,产物抑制,缓冲系统,反应液,缓冲液,硫酸盐
 |
| 第1页 |
参见附件(2211KB，3页)。
关晶华 许晓 陈新玲 王素君 张晓溪 袁京云 北京凯因生物技术有限公司暨病毒生物技术国家工程研究中心;
【摘要】目的:对重组腺苷蛋氨酸合成酶催化L-蛋氨酸(Met)和三磷酸腺苷(ATP)合成腺苷蛋氨酸的反应条件进行研究。方法:将重组腺苷蛋氨酸合成酶制成粗酶液,对其酶促反应条件进行研究和优化,摸索反应的最适pH值、最适反应时间及最适酶量,解决产物抑制问题和产物分解问题。根据试验摸索的条件进行450L生物反应罐的中试放大。结果:重组腺苷蛋氨酸合成酶催化Met和ATP合成的反应最适pH值为7.0,反应时间为8h,选择硼酸钠-硫酸缓冲液作为反应的缓冲系统,确定了反应液中酶液的最佳比例为1∶10,解决产物抑制问题的对甲苯磺酸钠的用量为9%,将镁离子和钾离子的盐酸盐形式改为硫酸盐形式,从而保证了最小限度的产物分解。中试放大结果:三批收率分别达到86.8%、87.1%和88.4%。结论:建立了重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应的方法,为酶促法合成腺苷蛋氨酸大规模生产奠定了基础。
【关键词】 重组腺苷蛋氨酸合成酶 酶促反应条件 对甲苯磺酸钠 反应时间 中试放大 产物抑制 缓冲系统 反应液 缓冲液 硫酸盐
【基金】北京市高成长企业自主创新科技专项
【分类号】R341
腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)是参与体内多种细胞代谢活动的一种重要的化合物,参与转甲基、转硫基和转氨基等生物代谢反应,它对慢性乙型肝炎[1]、胆汁淤积症[2]等疾病治疗具有可靠的疗效,在治疗各种常见的老年神经系统的多种疾病[3]和抗肝纤维化[4]中也将起到重要的
------
[摘要]目的：对重组腺苷蛋氨酸合成酶催化L-蛋氨酸(Met)和三磷酸腺苷(ATP)合成腺苷蛋氨酸的反应条件进行研究。方法：将重组腺苷蛋氨酸合成酶制成粗酶液，对其酶促反应条件进行研究和优化，摸索反应的最适pH值、最适反应时间及最适酶量，解决产物抑制问题和产物分解问题。根据试验摸索的条件进行450L生物反应罐的中试放大。结果：重组腺苷蛋氨酸合成酶催化Met和ATP合成的反应最适pH值为7.0，反应时间为8h，选择硼酸钠-硫酸缓冲液作为反应的缓冲系统，确定了反应液中酶液的最佳比例为1:10，解决产物抑制问题的对甲苯磺酸钠的用量为9%，将镁离子和钾离子的盐酸盐形式改为硫酸盐形式，从而保证了最小限度的产物分解。中试放大结果：三批收率分别达到86.8%、87.1%和88.4%。结论：建立了重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应的方法，为酶促法合成腺苷蛋氨酸大规模生产奠定了基础。
[关键词]重组腺苷蛋氨酸合成酶；腺苷蛋氨酸；酶促反应
[中图分类号]R34 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)06(a)-028-03
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2211KB，3页)。