多药耐药基因转染的CIK细胞耐药性研究
细胞因子诱导的杀伤,mdr,杀伤活性,肺癌细胞,基因表达,多药耐药性,顺铂
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李淑艳 王淑英 高涵 冯丽 富东娜 师岩 吴琦 郭红艳 齐晓丹 齐齐哈尔医学院生物化学教研室;
【摘要】目的:将多药耐药基因(mdr1)转入CIK细胞,观察转染前后其对顺铂的耐药性及对Lewis肺癌细胞杀伤活性的影响。方法:常规方法培养CIK细胞,在细胞对数生长期,将mdr1的重组质粒转染CIK,通过RT-PCR鉴定耐药基因表达;MTT法检测CIK细胞对顺铂敏感性的变化,同时检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性变化;Western blot检测细胞中mdr1编码的P-gp蛋白表达的变化;通过计算瘤重抑制率(TWI)检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用。结果:转染mdr1后的CIK细胞mdr1 mRNA阳性,在转染后的CIK细胞中,P-gp的表达较转染前CIK细胞及转染空质粒的CIK细胞明显增高,差异有统计学意义(P0.05),转染mdr1基因后的CIK细胞对顺铂的耐药性明显提高,转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性无明显变化(P0.05)。结论:将mdr1基因转入CIK细胞后,细胞获得了多药耐药性,同时保持了原有的对肿瘤细胞的杀伤活性。
【关键词】 细胞因子诱导的杀伤 mdr 多药耐药基因 基因转染 杀伤活性 肺癌细胞 耐药性研究 基因表达 多药耐药性 顺铂
【基金】黑龙江省教育厅基金资助项目(11541406)
【分类号】R73-3
肿瘤的治疗包括手术、放疗、化疗和生物治疗。在肿瘤生物治疗中,过继性细胞免疫疗法得到了广泛应用。CIK细胞是一种新型、高效的非MHC限制性的免疫活性细胞,在肿瘤过继性细胞免疫疗法中得到了广泛应用[1-2]。它可以在没有损伤机体免疫功能的前提下,直接杀伤肿瘤细胞,并且增强
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[摘要]目的：将多药耐药基因(mdrl)转入CIK细胞，观察转染前后其对顺铂的耐药性及对Lewis肺癌细胞杀伤活性的影响。方法：常规方法培养CIK细胞，在细胞对数生长期，将mdrl的重组质粒转染CIK，通过RT-PCR鉴定耐药基因表达：MTT法检测CIK细胞对顺铂敏感性的变化，同时检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性变化：Western blot检测细胞中mdrl编码的P-gp蛋白表达的变化；通过计算瘤重抑制率(TWI)检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用。结果：转染mdrl后的CIK细胞mdrl mRNA阳性，在转染后的CIK细胞中，P-gp的表达较转染前CIK细胞及转染空质粒的CIK细胞明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)，转染mdrl基因后的CIK细胞对顺铂的耐药性明显提高，转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性无明显变化(P>0.05)。结论：将mdrl基因转入CIK细胞后，细胞获得了多药耐药性，同时保持了原有的对肿瘤细胞的杀伤活性。
[关键词]细胞因子诱导的杀伤；mdrl；多药耐药；基因转染
[中图分类号]R392.1 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)12(b)-027-03
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