人牙龈成纤维细胞的原代培养及鉴定(2)
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参见附件。
2.3 细胞鉴定
2.3.1 形态学鉴定
倒置显微镜下,原代及传代生长的细胞呈长梭形或星形,核呈圆形或椭圆形,有数目不等、长短不同的胞质突,核仁清晰可见,呈典型的成纤维样细胞形态。原代培养的细胞以组织块为中心呈放射状生长,传代后的细胞呈放射状或漩涡状走行,排列紧密,有极性。
2.3.2 免疫学鉴定
光镜下对细胞进行免疫组化染色观察,显示细胞抗波形丝蛋白染色阳性,胞质内阳性颗粒均匀分布,胞核清晰、无染色;抗角蛋白染色阴性,证明细胞为中胚层来源,且无上皮源性细胞混杂。阴性对照组均未见阳性染色结果。
2.4 细胞生长曲线
见图1。
图1HGFs的生长曲线
3 讨论
牙周病是发生在牙齿支持组织(包括牙龈、牙周膜、牙槽骨和牙骨质)的慢性非特异性感染性疾病,是导致成年人失牙的主要原因[4]。随着老龄化社会的到来,牙周病尤其牙周炎更将成为突出的保健问题,是学者研究的热点和难点。广义上牙周病包括牙龈炎和牙周炎。牙龈炎是牙周炎的前驱和首要症状,防治牙龈炎可有效防止牙周炎的发生及发展。牙龈成纤维细胞是牙龈结缔组织中的主体细胞,不仅具有活跃的自身更新能力,而且可合成胶原纤维、弹性纤维及基质[5]。已有报道牙龈成纤维细胞具有一定的潜在成骨能力,使牙龈成纤维细胞有望成为牙周组织工程的种子细胞[6-7] ......
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