恰玛古蜜膏对小鼠免疫功能的影响(2)
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肿胀度=右耳重-左耳重。
肿胀抑制率(%)=[(模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组肿胀度]×100%。
1.4.2恰玛古蜜膏对小鼠单核-巨噬细胞碳清除能力的影响[5-7]选取昆明种小鼠40只,体重18～22 g,按性别、体重随机分为4组,分别为空白对照组和恰玛古蜜膏三个剂量(40、20、10 g/kg)给药组,各给药组连续灌胃给药10 d,对照组给等量的蒸馏水。末次给药1 h后,各组小鼠尾静脉注射印度墨汁生理盐水溶液(1∶4),按每10 g体重注射0.1 ml计算。各组小鼠分别于注射后2 min(T1)和10 min(T2)眼眶取血20 μl,加入2 ml 0.1% Na2CO3溶液中,摇匀后于600 nm测吸光度值A1和A2,将动物处死后,取肝、脾称重,计算碳廓清指数K值和吞噬指数α。
K=(logAl-logA2)/(T2-T1)。
α=■×体重/(肝重+脾重)。
1.4.3恰玛古蜜膏对小鼠血清中IgM抗体水平的影响[8-9]选取昆明种小鼠40只,动物分组及给药剂量同“1.4.2”,各给药组连续灌胃给药12 d,对照组给等量的蒸馏水。各组小鼠均在第4天给药后2 h腹腔注射SRBC悬液0.2 ml/只。末次给药1 h后,眼眶取血,离心分离血清,用生理盐水稀释200倍后按表1加样。
表1 测定样品吸光度值的加样
Tab.1 The spotting blank of determining the absorbance of sample
各管加样后于37℃水浴保温10 min,水浴终止反应后离心(2 000 r/min,10 min)。取上清液1 ml加都氏试剂3 ml于试管内。同时取SRBC稀释液0.25 ml、都氏试剂4 ml于另一支试管内,充分摇匀,放置10 min,于540 nm处以对照管作空白,分别测定各管吸光度值,计算半数溶血值HC50和抑制率。
HC50=(样品吸光度值/SRBC半数溶血吸光度值)×血清稀释倍数。
抑制率(%)=[(对照组HC50-给药组HC50)/对照组HC50]×100% ......
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