白藜芦醇对衰老昆明小鼠肝细胞作用机制的探讨(2)
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1.5 肝组织中Bcl-2及Bax的测定
用免疫组织化学SABC法,Bcl-2定位于核膜、粗面内质网和线粒体膜上,Bax定位于胞质。免疫细胞化学结果判定采用组织化学评分法。阳性染色为胞质内出现棕黄色颗粒,以i代表染色深浅,根据细胞着色的强弱分为4个等级:无着色0分,淡黄色1分,棕黄色2分,棕褐色3分。该评分法可反映单个细胞是否具有阳性表达及表达强弱,更客观地评价细胞蛋白的表达情况。
1.6 统计学分析
数据以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS 11.0软件分析,实验结果采用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 昆明小鼠血清SOD活力和MDA含量的变化
40、120、180 mg/ml各组白藜芦醇与衰老对照组比较,SOD水平有升高趋势,但差异无统计学意义,衰老对照组昆明小鼠SOD水平低于青年对照组(P<0.05)。衰老对照组MDA含量显著高于青年对照组,各白藜芦醇剂量组MDA含量均显著低于衰老对照组(P<0.05)。见表1。
表1昆明小鼠血清SOD活力和MDA含量的变化(x±s)
与衰老对照组比较,*P<0.05
2.2昆明小鼠肝细胞Bcl-2及Bax的表达情况(图1、2)
青年对照组中昆明小鼠肝组织肝细胞形态清晰,胞质丰富,细胞核大而圆,细胞生长旺盛(图1A);衰老对照组中可以见到肝组织中肝细胞界限不清,细胞核深染,胞质中可以见到染色深的棕黄色结构(图1B);白藜芦醇中剂量组可见肝组织Bcl-2表达量少的组织中棕黄色颗粒较少,Bax表达肝组织中棕黄色颗粒较多(图1D、图2D);提示衰老对照组Bcl-2表达降低,Bax表达升高,胞质中棕黄色的颗粒较多(图2B),Bcl-2/Bax比值明显减小,白藜芦醇剂量组Bcl-2表达有升高趋势,而Bax表达低于衰老对照组(P<0.05),各白藜芦醇剂量组之间差异有统计学意义,白藜芦醇剂量组Bcl-2/Bax比值高于衰老对照组(P<0 ......
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