石斛多糖提取工艺的研究(2)
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3.4 活性炭脱色
多糖成分中会存在一些残留色素,因此需要用活性炭脱色[9],加入后应多保留几分钟,使其脱色完全。
3.5 多糖提取过程中脱蛋白方法的选择
可得知A2B2C3为最佳组合,即V样品∶V氯仿-正丁醇=1∶1、V氯仿:V正丁醇=10∶2.5、提取时间为30 min时效果最佳,多糖得率为22.47%。
Sevag法脱蛋白的效果好于TCA法,粗多糖得率及多糖含量均较高,所需时间较短,但Sevag法也存在着重复多次、产生较多有机物质等弊端;而TCA步骤较简单,所用试剂较少,色素物质能在TCA液中随蛋白质沉淀而部分除去,有利于层析精制,但所需时间较长[10]。因此,笔者认为采用Sevag法除去石斛多糖中的蛋白质更为合适。
3.6 多糖沉淀的分离、洗涤、干燥
经乙醇沉淀后的多糖可通滤纸过滤、抽滤或者离心沉淀等分离得到,滤纸表面粗糙,过滤速度慢,消耗时间多,粘在上面的多糖不易洗脱,多糖获得率会因此降低,因此在分离时选用离心沉淀。粗制品烘干前用无水乙醇、乙醚涮洗,可除去多余水分。丙酮需加长洗涤时间、加大用量,尽量除去石斛多糖中的色素 ......
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