高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA含量的系统适用性优化
 |
| 第1页 |
参见附件(1008KB，2页)。
[摘要] 目的：对丹参酮ⅡA的高效液相色谱含量检测方法进行系统适用性优化。方法：对照品经配制后，在其他实验条件相同的情况下，采用不同比例的流动相甲醇：A(甲醇∶水为75∶25)、B(甲醇∶水为80∶20)、C(甲醇∶水为85∶15)进行试验比较。结果：经与《中国药典》2010年版提供的方法比较，在流动相为甲醇∶水(85∶15)的条件下丹参酮ⅡA的峰形更好、出峰时间更短、柱效更高。结论：优化本试验的系统适用性后，该法操作简便、快速、稳定性好、精密度高，并且可进一步节约试验成本，适合丹参酮ⅡA的含量测定。
[关键词] 丹参酮ⅡA；高效液相色谱法；系统适用性
[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号]1673-7210(2010)11(b)-049-02
Optimizing the system applicability of HPLC measurement of TanshinoneⅡA content
ZHENG Jincong, LIN Wangchun, YAO Buhua
(Mindong Hospital of Ningde City, Ningde 355000, China)
[Abstract] Objective: To optimize the system applicability of HPLC measurement of TanshinoneⅡA content. Methods: After the compound reference substance, using different proportion of mobile phase: A (CH3OH∶H2O for 75∶25); B (CH3OH∶H2O for 80∶20); C (CH3OH∶H2O for 85∶15) comparative experiments in other experiments under the same conditions. Results: Comparing with the method providing by the 2010 Ch. P, the peak shape of TanshinoneⅡA was better, the peak time was shorter, the column efficiency was higher, when the mobile phase was C (CH3OH∶H2O for 85∶15). Conclusion: After optimizing system applicability of the experiment，the method is more simple, faster, good stability and high precision and save test cost. It is suitable for the content determination of TanshinoneⅡA.
[Key words] TanshinoneⅡA; HPLC; System applicability
丹参酮ⅡA是丹参的重要有效成分之一，临床上能够改善冠心病、心绞痛和胸闷等症状[1]，并具有抗血管炎症的作用[2]。目前，《中国药典》2010年版对丹参酮ⅡA含量测定采用的高效液相色谱法的流动相条件的专属性差。为此，作者采用不同流动相比例进行试验，其结果分别与在《中国药典》2010年版规定的实验条件下得出的结果进行比较，摸索出了一套稳定性好、精密度高、出峰时间更短，并适用于丹参酮ⅡA含量测定HPLC法。
1 仪器与试药
安捷伦1200高效液相色谱仪；北京京立LG16-W型离心机；梅特勒托利多AL204型电子天平；威固特VGT-1730T型超声波清洗器；丹参酮ⅡA对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号：110766-20041667)；甲醇为色谱纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：安捷伦Hypersil ODS(4.0 mm ×250 mm，5 μm)；检测波长：270 nm；柱温：30℃；流速：1.0 ml/min；流动相：A(甲醇∶水为75∶25)[3]、B(甲醇∶水为80∶20)、C(甲醇∶水为85∶15)；进样量：20 μl。
2.2 贮备液的制备
精密称取丹参酮ⅡA对照品0.5 mg，加甲醇溶解，制成每毫升含量约为20 μg的溶液。
2.3 结果
2.3.1 色谱图 取一定量的贮备液，将其配制成浓度为10 μg/ml的溶液，在“2.1”项下方法操作进样，所得的不同比例流动相测得的丹参酮ⅡA的HPLC色谱图见图1。
2.3.2 色谱峰参数比较见表1。
表 1 不同流动相比例测得的丹参酮ⅡA的色谱峰参数
由表1数据可知，①三者的理论塔板数均大于2 000，符合《中国药典》2010年版规定。②色谱峰拖尾因子T用以衡量色谱峰的对称性，在《中国药典》2010年版中规定T应为0.95～1.05，从表1中可见，三者均符合要求。③刘德旺等[4]也采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA的含量，其保留时间为12 min左右，而丹参酮ⅡA在本试验色谱条件C下的保留时间为6.225 min，与色谱条件A、色谱条件B下的保留时间和刘德旺等报道的保留时间相比，均有显著缩短，这使试验更加快速，并可节约试验成本。④由表1可知，在A、B、C三个条件下出峰的峰宽W相比较为：WA>WB>WC，根据公式：W=4σ可知，W越小说明σ越小、分散程度越小、极点浓度越高、峰形越瘦、柱效越高[5]，说明在色谱条件C下出峰形状最好，试验柱效最高。由此可见，在色谱条件C下丹参酮ⅡA的出峰效果最好。
2.4 对色谱条件C的方法考察
2.4.1 线性关系考察分别精密量取上述贮备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml于10 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件C，分别进样20 μl，测定峰面积。以峰面积积分值(Y)为纵坐标，丹参酮ⅡA浓度(X)为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程为：Y=35.308X-45.208(r=0.998 9)，结果表明丹参酮ⅡA含量在2～10 μg/ml范围内，与峰面积呈良好线性关系。
2.4.2 稳定性试验取同一贮备液，分别于0、1、2、4、8、24 h在上述色谱条件C下进样，测得丹参酮ⅡA峰面积值的RSD为1 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1008KB，2页)。