扁平苔藓皮损中MIF\MMP-9的表达及意义(1)
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[摘要] 目的：探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)在扁平苔藓发病中的作用。方法：采用免疫组化方法和RT-PCR法检测30例扁平苔藓组织和30例正常皮肤组织中MIF与MMP-9的表达情况。结果：MIF与MMP-9在扁平苔藓组织中的表达明显高于正常皮肤组织，差异有统计学意义(P<0.05)；MIF和MMP-9在扁平苔藓皮损中的表达呈正相关(r=0.636，P<0.01)。结论：MIF在扁平苔藓基底膜带损坏过程中可能有促进作用，其机制可能与上调MMP-9的表达有关。
[关键词] 扁平苔藓；基底膜带；MIF；MMP-9
[中图分类号] R781.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2010)11(c)-013-02
The expression and significance of MIF and MMP-9 in lichen planus
WANG Hui, BAI Li
(Department of Dermatology, the First Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China)
[Abstract] Objective: To investigate the effect on the pathogenesis of MIF and MMP-9 in lichen planus. Methods: Immunchistochemical technique and reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) were used to test the expression of MIF and MMP-9 in 30 cases of lichen planus and 30 cases of normal skin. Results: The expressions of MIF and MMP-9 were markedly increased in lichen planus than those in the normal skin (P<0.05); there were positive correlations between the expression of MIF and MMP-9 in the cases of lichen planus (r=0.636, P<0.01). Conclusion: MIF may contribute to the damage of basement membrane zoster in lichen planus, which depends on inducing expression of MMP-9.
[Key words] Lichen planus; Basement membrane zoster; MIF; MMP-9
扁平苔藓(lichen planus)是一种病因不明的慢性或亚急性炎症性皮肤病，其组织学特征显示为上皮基底细胞的液化变性、基底膜带损伤。目前关于其基底膜带损伤机制的研究甚少。本文旨在检测扁平苔藓中MIF、MMP-9的表达，进一步探讨两者与扁平苔藓基底膜带损坏的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
病例组30例均系2008～2009年在我院皮肤科就诊，经临床和病理确诊的扁平苔藓患者。其中，男17例，女13例；年龄20～64岁，平均41.9岁。所有患者在半年内均未使用过激素和免疫抑制剂治疗。于患者典型皮损处取材。对照组30例为同期在我院整形科、普外科所取的正常皮肤组织，其中，男20例，女10 例；年龄 18～60岁，平均37.6岁。两组患者年龄、性别差异无统计学意义，具有可比性。各标本取材后分两份，一份经中性福尔马林液固定，石蜡包埋后用于免疫组化染色；另一份予以液氮迅速冷冻后置于-80℃冰箱保存，用作RT-PCR实验。
1.2 试剂
兔抗人MIF多克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品，兔抗人MMP-9多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。二步法PV-6000免疫组织化学检测试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。MIF、MMP-9引物由上海生工生物工程技术有限公司合成。
1.3 方法
1.3.1 免疫组化法采用PV-6000二步法：备用标本进行4 μm厚连续切片后脱蜡，3%H2O2去离子水阻断内源性过氧化物酶；滴加一抗(MIF 浓缩液1∶150稀释，MMP-9浓缩液1∶100 稀释)，37℃孵育1 h；滴加二抗PV-6000，37℃孵育20 min；二氨基联苯胺(DAB)显色，苏木素复染、脱水、封片。
1.3.2 RT-PCR法采用Trizol一步法提取各标本总RNA，并用分光光度法检测其浓度及纯度。加入逆转录反应体系合成cDNA，将其置于PCR反应体系，按RT-PCR试剂盒说明扩增GAPDH(作为内参照)、MIF、MMP-9。各基因引物如下，GAPDH上游引物：5′-TGA ACG GGA AGC TCA CTG G-3′ ......
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