双歧杆菌防治极低出生体重儿坏死性小肠结肠炎的作用研究(2)
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1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2005年1月～2008年5月在我院NICU住院治疗、经家属同意、愿意配合登记随访、所有患儿均为存活7 d并且开始胃肠道喂养的极低出生体重儿，共计183例，入院日龄0.12~23 h；胎龄28~32周，平均(30.00±1.70)周；入院体质量0.85~1.44 kg，平均(1.10±0.22)kg。患儿均有1或2种以上原发病，按照临床防治方法分为预防组95例和对照组88例，两组例数、胎龄、出生体质量、原发病、喂养方式等方面差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。两组合并症分布情况见表1。
表1 两组合并症分布情况(例)
1.2 方法
1.2.1 给药方法对照组针对原发病进行常规治疗，预防组在对照组治疗的基础上于生后7 d起给予口服或鼻饲双歧杆菌0.25亿个活菌/次(珠海丽珠医药集团丽珠制药厂生产，0.5亿个活菌/次，生产批号：2006802)，2次/d，连用7 d。
1.2.2 肠道菌群分析细菌学检查在两组患儿治疗7 d后进行，取新鲜粪便标本，按照张秀荣[3]的方法，进行快速薄层涂片、固定、改良、革兰染色、镜检，每份标本分别计数3个显微镜油镜视野下(10×100倍)的细菌总数，分别记录革兰阳性杆菌(G+b)、革兰阴性杆菌(G-b)、革兰阳性球菌(G+c)和革兰阴性球菌(G-c)百分比值。按照黎永学等[4]的方法进行大便双歧杆菌培养、革兰染色，双歧杆菌活菌数取常用对数表示。
1.3 观察指标
两组患儿均严密观察治疗过程中两组患儿体质量的变化和腹胀、呕吐、腹泻及NEC发生情况。出现异常及时作X线腹部平片检查，NEC 参照《艾弗里新生儿病学影印版》(第7版)诊断标准进行诊断和分度[5]。
1.4 统计学处理
数据以均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS 10.0统计软件进行统计分析，统计学分析采用t检验和χ2检验。
2 结果
2.1 两组患儿体质量的变化
住院期间预防组每日体质量增加(8.108±2.205)g，对照组的为(6.256±2.298)g，两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。
2.2 双歧杆菌预防NEC效果
预防组NEC发生率为2.10%(2/95)；对照组NEC发生率为11.36%(10/88)，两组NEC发生率比较差异有统计学意义(P<0.01)。
2.3 肠道菌群检测结果
预防组和对照组治疗前后肠道细菌总数、各菌群数及杆球菌比值检测结果见表2。由表2可知，两组治疗前比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)；两组治疗后7 d比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)；预防组治疗前后球菌比值比较，差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4 大便双歧杆菌数的比较
见表3。从表3可知，治疗前两组患儿大便双歧杆菌数(Log10n/g)的比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后7 d两组患儿大便双歧杆菌数(Log10n/g)的比较差异均有统计学意义(P<0.01)。预防组治疗前、治疗后7 d大便双歧杆菌数(Log10n/g)的比较差异有统计学意义(P<0.01)；对照组治疗前、治疗后7 d大便双歧杆菌数(Log10n/g)的比较差异无统计学意义(P>0.05)。此结果提示：补充歧杆菌数后患儿肠道双歧杆菌数显著增加。
表3 大便双歧杆菌数的比较(Log10n/g)(x±s)
3 讨论
因NEC主要发生于早产儿及低体重儿，使人们自然联想到胃肠道功能不成熟是该病的原因，肠道是人体消化吸收的场所，栖息着×1014个细菌，约500种[6]，这些细菌相互竞争、相互依赖与宿主保持动态平衡关系，与肠道黏膜共同构成生物屏障。双歧杆菌是肠黏膜屏障中生物屏障的主要成分，是人体主要的益生菌之一，参与了宿主的消化、营养、代谢、吸收、免疫及抗感染过程，尤其在维持机体肠黏膜屏障的完整性方面起重要作用[7-8]。本组研究中治疗后7 d预防组、对照组两组患儿大便双歧杆菌数的比较差异有统计学意义(P<0.01)，预防组治疗前、治疗后7 d大便双歧杆菌数的比较差异有统计学意义(P<0.01)。提示：补充歧杆菌数后患儿肠道双歧杆菌数显著增加。母乳喂养的婴儿肠道内该菌占总菌群的92%，随着年龄的增长，双歧杆菌数量逐渐减少甚至消失，其有很多作用，如与其他厌氧菌一起共同占据肠黏膜表面，形成生物屏障，阻止各种致病菌、条件致病菌的入侵[9]；通过调节肠道菌群减少内毒素生成或吸收，使血中内毒素水平下降[10-11]；增强人体免疫功能等，为早产儿早期补充双歧杆菌，防治NEC提供了充分的理论基础。本研究中预防组NEC发病率为2.10%，对照组NEC发生率为11.36%，两组比较差异有统计学意义，提示：给予极低出生体重儿预防性口服双歧杆菌能够减少NEC的发病率。
正常情况下肠道菌群总数及G+b、G-b、G+c、G-c的比率保持动态平衡，正常粪便杆菌和球菌的比例约为75∶25(即3∶1)，当肠道各类菌群数量变化即说明肠道菌群紊乱，而且，菌群紊乱程度和病变程度呈正相关。本研究中，预防组患儿杆菌和球菌比值治疗前、治疗后7 d能保持在正常范围内，差异无统计学意义(P>0.05)，而对照组患儿杆菌和球菌比值治疗前与治疗后7 d相比差异有统计学意义(P<0.01)。本研究发现预防组较对照组体质量增加明显，预防组每天体质量增加(8.108±2.205)g，对照组为(6.256±2.298)g，两组比较差异有统计学意义，与Kitajima等[8]报道相似。早产儿的生长发育离不开有效的营养，而这又赖于胃肠系统的吸收功能。本组研究中预防组体质量增加优于对照组，可能因为双歧杆菌喂养一定时间后，定植于早产儿肠道内，促进其肠道菌群稳定，提高喂养耐受，增加了营养吸收，并减少了可能因菌群失调造成胃肠功能紊乱导致的吸收障碍和丢失，因而有利于体质量增长。
[参考文献]
[1]李德渊,母得志.新生儿坏死性小肠结肠炎的研究进展[J].国际儿科学杂志,2007,34(6):444-447.
[2]Yosl CC. Neonatal necrotizing enterocolitis: diagnosis, management, and pathogenesis [J]. J Infus Nurs,2005,28(2):13-14.
[3]张秀荣.肠道菌群粪便涂片检查图谱[M].北京:人民军医出版社,2000:1-15.
[4]黎永学,姜明杰,张莉滟,等.一种改良大便双歧杆菌计数方法[J].中国微生态学杂志,2002,14(3):177-178.
[5]Taeusch HW, Balard RA.艾弗里新生儿病学(影印版)[M].7版.北京:科学出版社,2001:578-582.
[6]宋朝敏,王红,吴斌 ......
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