原子吸收分光光度法测定人血浆中聚普瑞锌的浓度(2)
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2.5 血浆样品室温放置稳定性考察
取人血浆,加入适量标准锌溶液,配制成血锌浓度增加值分别为0.2、0.5、1.0 mg/L的低、中、高三浓度样品,在室温条件下放置,分别在0 h和24 h按“血清样品锌浓度测定”项操作,测定血锌浓度。结果低、中、高三浓度的RSD分别为3.7%、2.9%、1.9%,样品在室温放置24 h 稳定。
2.6 反复冻融实验
取人血浆,加入适量标准锌溶液,配制成血锌浓度增加值分别为0.2、0.5、1.0 mg/L的低、中、高三浓度样品,在-40℃冰箱中冷冻后取出,室温融化,然后再冷冻,反复3次,按“血浆样品锌浓度测定”项操作,测定开始和3次冻融后样品血锌浓度。结果低、中、高三浓度的RSD分别为2.5%、3.3%、2.2%,样品在3次冻融过程中稳定。
2.7 冷冻放置稳定性考察
取人血浆,加入适量标准锌溶液,配制成血锌浓度增加值分别为0.2、0.5、1.0 mg/L的低、中、高三浓度样品,在-40℃冰箱中放置,分别在0、5、10、20、30 d取样,按“血浆样品锌浓度测定”项操作,测定血锌浓度。结果低、中、高三浓度的RSD分别为3.1%、2.5%、2.4%,样品在冷冻条件下放置30 d内稳定。
2.8 临床应用
12名健康受试者平均年龄为(22.67±3.27)岁,平均体重为(62.50±5.32) kg,平均身高为(169.00±4.20) cm,禁食10 h,空腹口服聚普瑞锌颗粒150 mg,分别于给药前0 h和开始给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8和12 h取静脉血4.0 ml,离心分离出血浆,按“血浆样品锌浓度测定”项操作,测定血锌浓度,得平均血锌浓度-时间曲线,见图1。
3 讨论
原子吸收光谱法测定血锌浓度有极高的选择性,测定方法有石墨炉和氢火焰两种,通过比较发现,石墨炉法虽然取样量少、灵敏度高,但重现性差。因此本实验采用稳定性好的氢火焰法测定血锌浓度,保证了测定结果的准确,有利于开展聚普瑞锌的人体药代动力学研究。
由于锌为人血浆中内源性物质,配制标准曲线不能采用空白血浆。通过溶液提升实验比较,0.1%曲拉通溶液的黏度与血浆基本一致,因此在配制标准锌溶液时,加入0.1%曲拉通溶液为基质,测定结果准确可靠。
本试验采用火焰原子吸收光谱法测定血锌的浓度,血样经1%硝酸稀释处理后,进行定量分析。综上所述,该方法具有选择性强、灵敏度高、稳定性好、操作简便的优点。
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