男性不育患者血清和精浆中铅、超氧化物歧化酶和丙二醛含量的研究(2)
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参见附件。
1.2 样品的采集与处理
1.2.1 精液标本的收集 受试者禁欲3～5 d，手淫法收集精液，标本置于37 ℃水浴中，液化30 min后作精液分析，余下精液3 000 r/ min 离心5 min，分离精浆，置-20℃保存备用。
1.2.2 血样采集 取肘内侧经脉血，采血区皮肤依次经过0.2%硝酸、去离子水、碘酒、酒精棉球消毒，用一次性真空管采血管取静脉血约2 ml，室温静置20 min后，2 000 r/min离心5 min，取血清于塑料具塞离心管中，-20℃保存备用。
1.3 方法
SOD活力采用黄嘌呤氧化酶比色法测定，MDA采用硫代巴比妥酸比色法测定，试剂盒均购自上海源叶生物科技有限公司，按说明书严格操作。铅含量测定采用原子吸收光谱法。采用北京伟力精子辅助分析仪进行精液分析。
1.4 统计学方法
采用SPSS 10.0软件对数据进行统计学分析，数据以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血清检测结果
不育组血清中SOD活力与对照组相比无明显变化，MDA含量与对照组相比，差异有高度统计学意义(P<0.01)。铅含量与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)。血清中各项指标的数据均为正态分布，见表1。
表1 两组男性血清中SOD活力、MDA和铅含量比较(x±s)
2.2 精浆检测结果
不育组精浆中SOD活力与对照组相比显著降低，差异有高度统计学意义(P<0.01)。MDA和铅含量与对照组相比显著升高(P<0.01)。不育组精浆中MDA含量和对照组铅含量数据均为正态分布，见表2 。
表2 两组男性精浆中SOD活力、MDA和铅含量比较(x±s)
3 讨论
精浆中少量的氧自由基对精子获能和完成顶体反应是必需的，但过多的氧自由基可使精子线粒体膜精子质膜发生质脂过氧化，内膜嵴减少、ATP 合成减少，从而影响精子活动力[3]。同时，脂质过氧化产生的降解产物，如MDA 等，可抑制精子线粒体功能和包括腺苷酸环化酶在内的多种酶的活性，影响精子的运动功能[4]。目前认为精浆中SOD 作为体内清除氧自由基的主要酶，是抑制脂质过氧化反应对精子损害的重要保护因子[5]。
导致体内自由基增多的因素主要有炎症性疾病，空气污染(包括烟雾、臭氧)、致癌性化学物质、油漆、石棉、某些药物、农药、射线、铅中毒等[6]。精子细胞是人体细胞对毒性物质最敏感的细胞，微量毒性物质便可造成精子的损伤。
由细菌感染因素[7]以及由炎症导致的抗精子抗体阳性患者[8]SOD活性降低和MDA含量升高已经有研究证实，因此，本研究排除了精液中白细胞增多患者。
通过检测无明显铅污染接触史的男性不育患者与对照组血清中SOD活力比较分析，男性不育症患者血清中SOD活力无明显变化，而铅和MDA含量较对照组显著升高。男性不育症患者与对照组精浆中SOD活力，MDA和铅含量比较分析显示，男性不育症患者精浆中SOD活力较对照组显著降低，而MDA和铅含量较对照组显著升高(P<0.01)。血清中SOD活力变化不明显，可能是血清中过氧化反应较轻，消耗SOD较少的原因。MDA含量在男性不育者血清和精浆中均有极显著性差异，这一结果提示，在测定MDA含量时可根据患者情况决定收集血清样本或精浆样本，以达到同样的诊断目的。
本文结果另一发现是无明显铅污染接触史的男性不育患者，血清和精浆中铅和MDA含量明显升高， 并伴有精浆中SOD活力降低和MDA含量升高，表明过氧化反应增强与体内铅含量升高有关，精液中氧自由基和MDA的增多可能是造成男性不育和精子质量下降的重要原因。这种结果会对精子的活力有较显著的影响[9]。它不但影响精子的功能， 而且还可以影响精子的生成和精子的形态[10]。表明男性不育的主要因素是受到了环境中铅的污染，因为铅的用途广泛，涉及到人们的衣食住行，铅可污染空气和土壤，通过呼吸道、消化道和皮肤黏膜进入人体，并且不易排出体外，可在体内储存几十年，对人体造成潜在的危害，精细胞较人体其他细胞对于毒性物质的损害敏感，容易受到伤害，这种伤害应引起人们的高度重视，它可造成男性不育，还可影响到下一代人的身体健康。
综上所述，血清和精浆中铅含量的升高，可能是导致精浆中SOD活性降低，MDA含量升高的主要因素，为男性不育患者提供排铅和抗氧化诊治方案提供了可靠依据。
[参考文献]
[1] 姜全心.男性不育患者精浆SOD和MDA含量的观察[J].临床和实验医学杂志,2005,4(4):223-224.
[2] 孙飞.汽车司机MDA、GSH、SOD检测报告[J].中国公共卫生,2002,18(2):187.
[3] 段东升.氧自由基与精子功能[J].男性学杂志,1990,4:121-123.
[4] Selley ML, Lacey MJ, Bartlett MK, et al. Coutent of significant amounts of a cytotoxic endproduct of lipid peroxidation in human semen [J]. Reprod Fertil,1991,92(2):29-33 ......
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