气相色谱法测定盐酸法舒地尔中有机溶剂残留量(2)
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分析甲醇、二氯甲烷的程序升温：初始柱温55℃，平衡0.5 min，以40℃/min的速度升温至70℃，平衡1 min，以40℃/min的速度升温至180℃，平衡3 min。
分析N，N-二甲基甲酰胺的程序升温：初始柱温50℃，平衡3 min，以20℃/min的速度升温至180℃，平衡3 min。
2.2 溶液的制备
2.2.1 甲醇、二氯甲烷溶液的制备
2.2.1.1 对照品溶液的制备 分别取甲醇、二氯甲烷适量，精密称定，用二甲基甲酰胺(DMF)稀释成1 mL约含甲醇300 μg、二氯甲烷60 μg的溶液，另加0.5 mL内标溶液。内标物质具体制备为：取分析纯苯约60 mg，精密称定，置于50 mL量瓶中，加DMF并稀释至刻度，振匀。
2.2.1.2 供试品溶液的制备 取盐酸法舒地尔1.0 g，精密称定，置10 mL容量瓶中，加入0.5 mL内标溶液，用DMF稀释至刻度，振摇使溶解，即得。
2.2.2 N，N-二甲基甲酰胺溶液的制备
2.2.2.1 对照品溶液的制备 取N，N-二甲基甲酰胺定量稀释制成每1 mL中分别约含88 μg的溶液，另精密量取内标溶液0.5 mL置于该量瓶中，用20%甲醇稀释至刻度，振匀。内标物质具体制备为：取分析纯N，N-二甲基乙酰胺约80 mg，精密称定，置于50 mL量瓶中，加20%甲醇稀释至刻度，振匀。
2.2.2.2 供试品溶液的制备 另取本品约0.1 g，精密称定，取0.5 mL内标溶液，置于10 mL量瓶中，20%甲醇稀释至刻度，充分振摇。
2.3 测定方法
分别取对照溶液和供试品溶液，按上述色谱条件测定，甲醇、二氯甲烷结果，见图1、2；N，N-二甲基甲酰胺结果，见图3、4。
2.4 线性关系考察
分别精密称取甲醇、二氯甲烷适量，用DMF稀释成含甲醇0.065 7、0.657 0、6.570 0、65.700 0、657.000 0 μg/mL，含二氯甲烷1.76、17.60、176.00、246.40、316.80 μg/mL，取以上各浓度溶液10 mL，分别加入0.5 mL苯内标溶液，用20%甲醇稀释成含N，N-二甲基甲酰胺0.166、1.660、16.600、66.400、83.000、99.600 μg/mL的溶液备用，取此系列浓度溶液10 mL分别加入0.5 mL N，N-二甲基乙酰胺内标溶液，取1 μL样品直接进样以AR/AS为纵坐标(Y)，浓度为横坐标(X)，计算甲醇、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺的回归方程分别为Y = 1.012 2X + 0.002 9(r = 1.000 0)、Y = 0.438 7X + 0.000 2(r = 0.999 1)、Y = 10.857X + 0.056(r = 0.999 8)。结果表明甲醇在0.065 7～657.000 0 μg/mL，二氯甲烷在0.76～316.80 μg/mL，N，N-二甲基甲酰胺在0.166～99.600 μg/mL的浓度范围内呈较好的线性关系。
2.5 精密度试验
取对照品溶液，连续测定6次，结果甲醇溶液中苯/甲醇的峰面积的RSD为1.02%，二氯甲烷溶液中苯/二氯甲烷的峰面积的RSD为1.61%，N，N-二甲基甲酰胺溶液中苯/DMF的峰面积的RSD为3.13%，符合《中国药典》2010年版规定的有机溶剂残留内标法测定精密度的要求(RSD不大于5%)。见表1。
2.6 最低检测限的测定
取“2.4”项下的标准溶液，采用逐步稀释法，按上述色谱条件进样，测得甲醇、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺的检测限(S/N=3)分别为0.065 7、1.100 0、0.016 6 μg/mL。
2.7 回收率试验
2.7.1 甲醇、二氯甲烷回收率试验测定
分别量取甲醇、二氯甲烷对照储备液0.5、4.0、5.0 mL，置10 mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为浓度为12%、100%、120%的混合加样溶液。分别精密称取已知残留量的供试品(批号：20080603)各0.1 g，分别加以上各浓度的混合溶液10 mL使其溶解，摇匀，分别依法测定，计算各有机溶剂的平均回收率。见表2。
表2 甲醇、二氯甲烷回收率测定结果
2.7.2 N，N-二甲基甲酰胺回收率试验测定
分别量取N，N-二甲基甲酰胺对照储备液 4、5、6 mL，置10 mL量瓶中，加0.5 mL内标溶液，用20%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为浓度为80%、100%、120%的混合加样溶液。分别精密称取已知残留量的供试品(批号：20080601)各0.1 g，分别加以上各浓度的混合溶液10 mL使其溶解，摇匀，分别依法测定，计算N，N-二甲基甲酰胺平均回收率，见表3。
表3 N，N-二甲基甲酰胺回收率测定结果
2.8 样品测定
取盐酸法舒地尔样品3批，各约1.0 g，精密称定，置10 mL量瓶中，加0.5 mL内标溶液和DMF溶解并定容，摇匀，平行制备3份。加0.5 mL内标溶液和20%甲醇溶解并定容，摇匀，平行制备3份。按上述色谱条件进样，以内标法计算，取平均值作为测定结果。见表4。由表4可知，3批样品的残留溶剂均符合规定(残留溶剂甲醇≤0.3%，二氯甲烷≤0.06%，DMF≤0.088%)。
表4 残留溶剂检测结果(%)
3 讨论
3.1 进样方式的选择
通常采用顶空进样和直接进样的方法，由于N，N-二甲基甲酰胺沸点为180℃，不能采用顶空进样法，改用直接进样，但是N，N-二甲基甲酰胺出峰较晚，不能选用高沸点溶剂作溶媒，但如果选用低熔点溶剂作溶媒又干扰了甲醇及二氯甲烷的出峰，所以检测3种残溶不能共用同一种溶媒。因此，选用两种溶媒，采用两种不同的程序升温，进行测定样品中甲醇、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺含量。
3.2 色谱柱的选择
本实验室曾选用不同极性及不同口径的毛细管色谱柱，如SE-54(30 m×0.32 mm，0.25 μm)、SE-54(30 m×0.53 mm，5.0 μm)、FFAP(25 m×0.32 mm，0.50 μm) 经多次试验采用SE-54(30 m×0.53 mm，5.0 μm)柱，可使DMF达到较好的基线分离 ......
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