大孔树脂纯化野葛总黄酮的工艺研究(2)
2.1.5 动态吸附试验取静态吸附试验筛选出的理想树脂20 g，湿法装柱(2 cm×30 cm)，对于吸附泄露曲线、上样液的浓度及pH值等因素进行动态吸附试验，以获得该树脂的动态试验最佳工艺条件[11-12]。
2.2 结果分析
2.2.1 大孔树脂的静态吸附与解吸能力比较分别测定了5种树脂的饱和吸附量及解吸率，通过比较优选出综合性能较好的1种树脂，用于后续的动态试验研究。不同种类树脂的静态吸附和解吸结果，见表1。
从图1中可看出，上样液浓度对于野葛总黄酮的吸附影响较大。若上样液浓度低，传质未进行彻底就可能泄漏，且吸附处理时间延长，效率降低，不利于实际工业生产；若上样液浓度太大，则黏度大，传质速度变慢，黄酮未吸附就已泄露，吸附率依然低下。因此，当上样液浓度约为9.82 mg/mL时，树脂吸附率最大，可达91%以上。
, 百拇医药 2.2.3 动态吸附泄露曲线取野葛粗提液(总黄酮浓度9.82 mg/mL)加于柱顶，以2BV/h的流速进行动态吸附，收集流出液，于250 nm处测定吸光度，绘制泄露曲线。见图2。
从图2可看出，树脂在吸附1BV时就有轻微泄漏，上样量超过2BV后，洗脱液浓度变化不大，在4BV时基本达到饱和，可知树脂的动态平衡吸附浓度为9.41 mg/mL，从经济角度考虑，上样量选择2BV。
2.2.4 动态解吸曲线将上述经动态吸附的树脂，先用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再以70%乙醇以2BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，测定吸光度，绘制该树脂的解吸曲线。见图3。
由图3可知，采用70%乙醇洗脱基本没有拖尾，洗脱液用量为4BV时，基本可将吸附的总黄酮洗净。
2.2.5 乙醇体积分数的影响取一定量提取液(总黄酮浓度为9.82 mg/mL)，以2BV/h的流速进行动态吸附，之后用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再分别用体积分数为10%、30%、50%、70%、90%的乙醇以2BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，测定吸光度。见图4。
, 百拇医药
从图4中可看出，对于AB-8这种弱极性树脂来说，当乙醇体积分数过小，极性较大，柱上吸附的总黄酮不易解吸。因此，当乙醇体积分数为70%，洗脱效果较好，解析率可达92%以上。
2.2.6 洗脱pH的影响取一定量提取液(总黄酮浓度9.82 mg/mL)，用1 mol/L的HCl或1 mol/L的NaOH调节pH值为1～2、3～4、5～6、7～8、9～10，之后用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再以70%乙醇2BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，测定吸光度。见图5。
3 讨论
通过考察5种不同型号的大孔树脂对于野葛总黄酮提取液的吸附率及解析率，优选出AB-8型树脂。选用AB-8型树脂装柱，进一步通过动态试验获得AB-8型树脂最优工艺条件为：上样液浓度9.82 mg/mL，上样液体积2 BV，洗脱剂乙醇体积分数70%，洗脱pH 5~6，可达较好的吸附及解吸效果。其吸附率吸附率可达91.21%，解吸率可达93.61%。试验中发现再生树脂的吸附率有明显下降，需要进一步试验可行的树脂再生方法，以提高其工业化应用价值。
, 百拇医药
[参考文献]
[1]杨东晖，陈浪，曾志，等.葛根化学成分的研究[J].华南师范大学学报：自然科学版，2002，1(4)：94-97.
[2]华辉，郭勇.黄酮类化合物药理研究进展[J].广东药学，1999，9(4)：9-12.
[3]蒲自和，王宁.葛根的药理学研究进展[J].西北药学，2000，15(2)：81-83.
[4]励娜，杨荣平，张小梅，等.大孔树脂分离山楂总黄酮工艺优化[J].中国中药杂志，2007，32(13)：1352-1355.
[5]张素华，王正云.大孔树脂纯化芦笋黄酮工艺的研究[J].食品科学，2006，27(6)：182-186.
[6]Huang ZH，Fang GZ，Zhang B.Separation and purification of Arabinogalactan obtained from Larix gmelinii by macroporous resin adsorption [J]. Journal of Forestry Research，2007，18(1)：81-83.
, 百拇医药
[7]Zhang Y，Li SF，Wu XW，et al.Macroporous resin adsorption for purification of flavonoids in Houttuynia cordata Thunb [J].Chinese Journal of Chemical Engineering，2007，15(6)：872-876.
[8]Liu YF，Liu JX，Chen XF，et al.Preparative separation and purification of lycopene from tomato skins extracts by macroporous adsorption resins [J].Food Chemistry，2010，123(4)：1027-1034.
[9]Gao M，Huang W，Liu CZ.Separation of scutellarin from crude extracts of Erigeron breviscapus(vant.)Hand. Mazz. by macroporous resins [J].Journal of Chromatography B，2007，858(1-2)：22-26.
[10]李萍.大孔吸附树脂在中草药有效成分研究中的应用[J].天津药学，2002，14(3)：9-11.
[11]潘见，陈强，谢慧明，等.大孔树脂对葛根黄酮的吸附分离特性研究[J].农业工程学报，1999，15(1)：236-240.
[12]周媛，程凡，罗少华.大孔树脂对葛根总黄酮的吸附及分离纯化研究[J].时珍国医国药，2007，18(12)：3008-3010.
(收稿日期：2011-本文编辑：卫 轲), 百拇医药(陈雅维)
2.2 结果分析
2.2.1 大孔树脂的静态吸附与解吸能力比较分别测定了5种树脂的饱和吸附量及解吸率，通过比较优选出综合性能较好的1种树脂，用于后续的动态试验研究。不同种类树脂的静态吸附和解吸结果，见表1。
从图1中可看出，上样液浓度对于野葛总黄酮的吸附影响较大。若上样液浓度低，传质未进行彻底就可能泄漏，且吸附处理时间延长，效率降低，不利于实际工业生产；若上样液浓度太大，则黏度大，传质速度变慢，黄酮未吸附就已泄露，吸附率依然低下。因此，当上样液浓度约为9.82 mg/mL时，树脂吸附率最大，可达91%以上。
, 百拇医药 2.2.3 动态吸附泄露曲线取野葛粗提液(总黄酮浓度9.82 mg/mL)加于柱顶，以2BV/h的流速进行动态吸附，收集流出液，于250 nm处测定吸光度，绘制泄露曲线。见图2。
从图2可看出，树脂在吸附1BV时就有轻微泄漏，上样量超过2BV后，洗脱液浓度变化不大，在4BV时基本达到饱和，可知树脂的动态平衡吸附浓度为9.41 mg/mL，从经济角度考虑，上样量选择2BV。
2.2.4 动态解吸曲线将上述经动态吸附的树脂，先用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再以70%乙醇以2BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，测定吸光度，绘制该树脂的解吸曲线。见图3。
由图3可知，采用70%乙醇洗脱基本没有拖尾，洗脱液用量为4BV时，基本可将吸附的总黄酮洗净。
2.2.5 乙醇体积分数的影响取一定量提取液(总黄酮浓度为9.82 mg/mL)，以2BV/h的流速进行动态吸附，之后用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再分别用体积分数为10%、30%、50%、70%、90%的乙醇以2BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，测定吸光度。见图4。
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从图4中可看出，对于AB-8这种弱极性树脂来说，当乙醇体积分数过小，极性较大，柱上吸附的总黄酮不易解吸。因此，当乙醇体积分数为70%，洗脱效果较好，解析率可达92%以上。
2.2.6 洗脱pH的影响取一定量提取液(总黄酮浓度9.82 mg/mL)，用1 mol/L的HCl或1 mol/L的NaOH调节pH值为1～2、3～4、5～6、7～8、9～10，之后用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再以70%乙醇2BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，测定吸光度。见图5。
3 讨论
通过考察5种不同型号的大孔树脂对于野葛总黄酮提取液的吸附率及解析率，优选出AB-8型树脂。选用AB-8型树脂装柱，进一步通过动态试验获得AB-8型树脂最优工艺条件为：上样液浓度9.82 mg/mL，上样液体积2 BV，洗脱剂乙醇体积分数70%，洗脱pH 5~6，可达较好的吸附及解吸效果。其吸附率吸附率可达91.21%，解吸率可达93.61%。试验中发现再生树脂的吸附率有明显下降，需要进一步试验可行的树脂再生方法，以提高其工业化应用价值。
, 百拇医药
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[8]Liu YF，Liu JX，Chen XF，et al.Preparative separation and purification of lycopene from tomato skins extracts by macroporous adsorption resins [J].Food Chemistry，2010，123(4)：1027-1034.
[9]Gao M，Huang W，Liu CZ.Separation of scutellarin from crude extracts of Erigeron breviscapus(vant.)Hand. Mazz. by macroporous resins [J].Journal of Chromatography B，2007，858(1-2)：22-26.
[10]李萍.大孔吸附树脂在中草药有效成分研究中的应用[J].天津药学，2002，14(3)：9-11.
[11]潘见，陈强，谢慧明，等.大孔树脂对葛根黄酮的吸附分离特性研究[J].农业工程学报，1999，15(1)：236-240.
[12]周媛，程凡，罗少华.大孔树脂对葛根总黄酮的吸附及分离纯化研究[J].时珍国医国药，2007，18(12)：3008-3010.
(收稿日期：2011-本文编辑：卫 轲), 百拇医药(陈雅维)