[摘要] 目的 建立兔肢体缺血模型，观察二次外周血干细胞移植对肢体缺血的治疗效果。 方法 连续4 d皮下注射7.5 μg/kg G-CSF进行干细胞动员，分离外周血单个核细胞制成干细胞悬液。制备兔肢体缺血模型，将干细胞悬液分10～12个点注射于手术切口两侧肌肉，实验组动物于移植后第18天重复进行干细胞动员并在第22天进行第二次干细胞移植。 结果 术后多普勒超声显示手术肢体的血液供应阻断，模型制备成功。1周后检测侧支循环开始建立，实验6周后，二次移植兔缺血部位肌肉毛细血管密度平均为26.1个，单次移植兔为20.9个，差异有统计学意义(P < 0.05)。 结论 二次外周血干细胞移植能更好地改善肢体缺血。

    [关键词] 缺血模型；外周血干细胞；二次移植

    [中图分类号] R332[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210(2012)04(b)-0035-03

    骨髓干细胞移植治疗肢体缺血安全、有效[1]。但由于采髓量大，对患者的全身情况要求高，若进行第二次采髓增加干细胞移植次数相对困难。随着干细胞研究技术的深入发展以及自体外周血干细胞移植治疗肢体缺血技术的出现，采集第二次外周血干细胞对肢体缺血的治疗成为可能。本研究通过手术切除兔下肢动脉血管建立肢体缺血模型，并以自体外周血干细胞移植一次为对照，旨在通过增加外周血干细胞移植次数研究对肢体缺血的改善作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    新西兰白兔27只，体重2.6～3.4 kg ......