锌盐对体外呼吸道合胞病毒的作用研究(2)
1.3 方法1.3.1 病毒对细胞半数感染量(TICD50)测定用Hep-2单层细胞瓶复苏RSV标准株后,将毒株按1×10-1~1×10-6稀释度分别接种单层24孔细胞板,每稀释度接种细胞板4孔,0.5 mL/孔,设细胞对照,37℃培养,连续观察7 d,按细胞病变(CPE)程度,用Reed-Muench法计算出细胞半数感染量TICD50(两孔细胞病变的稀释度)。
1.3.2 锌盐对细胞的毒性试验按硫酸锌和醋酸锌的分子量,配制出锌盐溶液,灭菌。用细胞生长液将硫酸锌和醋酸锌分别稀释成20 mmol/L、2 mmol/L,200 μmol/L和20 μmol/L四个浓度,与消化的细胞混合后,分别接种24孔细胞板,每个浓度种4孔,0.5 mL/孔,设细胞对照,37℃培养,连续观察7 d,以细胞100%贴壁生长且形态正常时所用的锌盐浓度为细胞的安全浓度。
1.3.3 先病毒后锌盐试验先用单层细胞板感染100倍TICD50的病毒 ......
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