人脐血内皮祖细胞的体外培养
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王明勇 李燕 宋淑敏 彭强 泸州医学院附属医院医学实验中心;泸州医学院附属医院小儿外科;
【摘要】目的从人脐带血中分离内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),建立人脐血内皮祖细胞体外培养的方法,为实现内皮祖细胞的移植及实验研究提供足量的细胞来源。方法采用密度梯度离心法分离人脐带血内皮祖细胞,在EGM-2培养基中培养,采用流式细胞仪、免疫组化和免疫荧光鉴定EPCs。结果脐带血单个核细胞在经EGM-2培养过程中出现梭形贴壁和铺路石样等形态;1周后既分化成EPCs,细胞免疫荧光CD133染色率在培养第7天为(67.2±2.12)%,免疫组化CD34染色率为(89.67±2.05)%,流式细胞仪鉴定该种细胞CD133与KDR的双阳性率达87.8%。可确定该细胞为EPSc。结论采用本培养方法可获得良好的内皮祖细胞用于实验研究。
【关键词】 细胞培养技术 单个核细胞 人脐血 内皮祖细胞
【基金】国家自然科学基金资助项目(30700876) 四川省教育厅资助项目(2006B026)
【分类号】R329.23
自1997年Asahara等[1]首次在成人外周血分离到循环内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)以来,此后又陆续在骨髓、脐带血和其他软体组织中发现EPCs[2]。内皮祖细胞是来源于骨髓、外周血及脐带血和其他软体组织在外周血中循环,并能增殖分化为成熟的内皮细胞的一类前
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[摘要] 目的 从人脐带血中分离内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，建立人脐血内皮祖细胞体外培养的方法，为实现内皮祖细胞的移植及实验研究提供足量的细胞来源。 方法 采用密度梯度离心法分离人脐带血内皮祖细胞，在EGM-2培养基中培养，采用流式细胞仪、免疫组化和免疫荧光鉴定EPCs。 结果 脐带血单个核细胞在经EGM-2培养过程中出现梭形贴壁和铺路石样等形态；1周后既分化成EPCs，细胞免疫荧光CD133染色率在培养第7天为(67.2±2.12)%，免疫组化CD34染色率为(89.67±2.05)%，流式细胞仪鉴定该种细胞CD133与KDR的双阳性率达87.8%。可确定该细胞为EPSc。 结论 采用本培养方法可获得良好的内皮祖细胞用于实验研究。
[关键词] 细胞培养技术；单个核细胞；人脐血；内皮祖细胞
[中图分类号] R329.23 [文献标识码] C [文章编号] 1673-7210(2012)05(a)-0032-03
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