TCAB1慢病毒表达载体的构建及其在人子宫内膜间质细胞中的表达(3)
实现基因的过表达(gain of function)是基因功能研究的重要策略，其中慢病毒载体是基因表达的重要工具。慢病毒载体是以人类免疫缺陷Ⅰ型病毒为基础发展起来的基因治疗载体，该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久表达。同时由于对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力，对于干细胞和原代细胞研究具有重要意义。慢病毒的感染效率高、激发免疫反应的作用弱，而且目前没有证据表明其对宿主细胞有毒性作用或影响宿主细胞的活力。慢病毒表达载体感染后所获得的稳转细胞基因表达稳定、持续时间长，避免了瞬时转染每次试验均需重复操作的试验过程，而且也避免了瞬时转染时所需转染试剂对实验的影响。因此本实验选择慢病毒载体研究基因的工具。本实验选择的慢病毒表达载体是pLVX-IRES-ZsGreen1，ZsGreen1荧光蛋白可以作为包被及病毒感染时候的marker，可以方便的观察转染和病毒感染效率，也可以在后续研究中通过荧光筛选稳定表达株。本实验成功构建人TCAB1基因特异性的重组慢病毒过表达载体,且证实包被的慢病毒可实现TCAB1基因在人子宫内膜间质细胞株的过表达，为后续人TCAB1在人子宫内膜间质细胞的功能研究奠定了良好的实验基础。
[参考文献]
[1] Goldblatt EM，Gentry ER，Fox MJ，et al. The telomerase template antagonist GRN163L alters MDA-MB-231 breast cancer cell morphology，inhibits growth，and augments the effects of paclitaxel [J]. Mol Cancer Ther，2009，8(7)：2027-2035.
[2] Huang W，Rha GB，Chen L，et al. Inhibition of telomerase activity alters tight junction protein expression and induces transtendo helial migration of HIV-1 infected cells [J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2010，298(4)：1136-1145.
[3] Taylor RN，Yu J，Torres PB，et al. Mechanistic and therapeutic implications of angiogenesis in endometriosis [J]. Reprod Sci，2009，16(2)：140-146.
[4] Mahmoudi S，Henriksson S，WeibrechtⅠ，et al. WRAP53 is essential for Cajal body formation and for targeting the survival of motor neuron complex to Cajal bodies [J]. PLoS Biol，2010，8(11)：e1000521.
[5] Mahmoudi S，Henriksson S，Farnebo L，et al. WRAP53 promotes cancer cell survival and is a potential target for cancer therapy [J]. Cell Death Dis，2011，2：114.
[6] Hapangama DK，Turner MA，Drury JA，et al. Endometriosis is associated with aberrant endometrial expression of telomerase and increased telomere length [J]. Hum Reprod，2008，23(7)：1511-1519.
(收稿日期：2012-02-21 本文编辑：郝明明), 百拇医药(顾林 史颖莉 倪婕 陈捷 李瑛)
[参考文献]
[1] Goldblatt EM，Gentry ER，Fox MJ，et al. The telomerase template antagonist GRN163L alters MDA-MB-231 breast cancer cell morphology，inhibits growth，and augments the effects of paclitaxel [J]. Mol Cancer Ther，2009，8(7)：2027-2035.
[2] Huang W，Rha GB，Chen L，et al. Inhibition of telomerase activity alters tight junction protein expression and induces transtendo helial migration of HIV-1 infected cells [J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2010，298(4)：1136-1145.
[3] Taylor RN，Yu J，Torres PB，et al. Mechanistic and therapeutic implications of angiogenesis in endometriosis [J]. Reprod Sci，2009，16(2)：140-146.
[4] Mahmoudi S，Henriksson S，WeibrechtⅠ，et al. WRAP53 is essential for Cajal body formation and for targeting the survival of motor neuron complex to Cajal bodies [J]. PLoS Biol，2010，8(11)：e1000521.
[5] Mahmoudi S，Henriksson S，Farnebo L，et al. WRAP53 promotes cancer cell survival and is a potential target for cancer therapy [J]. Cell Death Dis，2011，2：114.
[6] Hapangama DK，Turner MA，Drury JA，et al. Endometriosis is associated with aberrant endometrial expression of telomerase and increased telomere length [J]. Hum Reprod，2008，23(7)：1511-1519.
(收稿日期：2012-02-21 本文编辑：郝明明), 百拇医药(顾林 史颖莉 倪婕 陈捷 李瑛)