中药黄芩HPLC指纹图谱的化学轮廓及其影响因素的研究(3)
第1页 |
第3页 |
参见附件。
2.6.4 多因素对黄芩指纹图谱的影响
在274 nm检测波长下,改变其他条件以考察色谱方法普适性、耐用性。在方法二色谱条件下得到黄芩药材(产于黑龙江省杜蒙县一心乡,编号:99002,野生黄芩)的供试溶液的色谱图(图6B)。对照紫外光谱对方法二检测的指纹图谱色谱峰进行标示,与原方法色谱图(图6A)相比,可见两种方法检测到的指纹图谱中,色谱峰的化合物种类、出峰顺序没有发生改变,提取物指纹图谱化学轮廓没有明显的改变,但是指纹峰的保留时间和分离度发生了较大的变化。
3 讨论
本文利用83份不同产地的黄芩样品建立了包含29个共有峰的中药黄芩HPLC指纹图谱,利用对照品和LC-MSn技术对其中的27个化合物进行了指认和鉴定,在一定条件下该方法具有良好的精密度、稳定性、重复性。所建立的黄芩HPLC指纹图谱方法在一定条件下具有很好的稳定性和实用性,可用于黄芩药材的化学轮廓研究进而评价黄芩的质量;利用此方法,进一步从化学角度对不同规格和产地的黄芩药材进行比较,与课题组前期所做的对不同规格的黄芩药材及非道地与道地黄芩药材的药效学试验[9-10]比对,可用于黄芩谱效关系的研究。
但是指纹图谱方法在实际应用条件下运行时,常受到多种因素的影响。本文分别考察了不同检测波长、色谱柱、洗脱梯度以及综合测定条件对指纹图谱的影响,结果显示,在其他条件固定的情况下,检测波长对黄芩指纹图谱的化学轮廓影响很大;分别使用不同色谱柱、不同柱温、不同洗脱梯度的情况下得到的指纹图谱,虽然化合物种类、出峰顺序都没有明显变化,但是色谱峰的保留时间和分离度会发生很大的变化,并会导致提取物化学轮廓发生较大的改变。变换色谱仪厂牌和柱温亦可以对指纹峰的保留时间和分离度产生较大的影响。所以黄芩指纹图谱在实际应用中须严格控制规定的测定条件和各种因素,以确保所得指纹图谱稳定可靠。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:282.
[2] Lei Zhang,Ruo-Wen Zhang,Qing Li,et al. Development of the fingerprints for the quality evaluation of scutellaria Radix by HPLC-DAD and LC-MS-MS [J]. Chromatogr,2007,66(1-2):13.
[3] Guozhu Liu,Jinyu Ma,Yingzhuang Chen,et al. Investigation of flavonoid profile of Scutellaria bacalensis Georgi by high performance liquid chromatography with diode array detection and electrospray ion trap mass spectrometry [J]. J Chromatogr A,2009,1216(23):4809.
[4] Guozhu Liu,Nautiyal Rajesh,Xiaosong Wang,et al. Identification of flav onoids in the stems and leaves of Scutellaria baicalensis Georgi [J]. J Chromatogr B,2011,879(13-14):1023 ......
您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件(5935kb)。