丝瓜籽核糖体失活蛋白基因Luffin—a原核表达载体的构建(1)

http://www.100md.com 2013年3月5日 中国医药导报2013年第7期

     [摘要] 目的 探讨丝瓜籽核糖体失活蛋白基因Luffin-a原核表达载体的构建方法。 方法 从Pubmed中查到Luffin-a的mRNA全序列，用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜种子中克隆Luffin-a基因，T-A克隆后鉴定核苷酸序列，构建原核表达载体pET-15b(+)-Luffin-a，转化大肠杆菌BL21(DE3)，并经IPTG诱导表达；SDS-PAGE鉴定Luffin-a表达产物。结果 克隆出Luffin-a基因，IPTG诱导后大肠杆菌培养液和超声破碎的菌体沉淀中都有Luffin-a表达产物。 结论 本研究成功构建了Luffin-a原核表达载体。

    [关键词] 丝瓜籽；核糖体失活蛋白；Luffin-a基因

    [中图分类号] R3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)03(a)-0022-03

    核糖体失活蛋白(RIP)是一种能够使真核细胞核糖体28s rRNA第4 324位腺嘌呤糖苷键水解、断裂 ......