应用ADx—ARMS法对大肠癌组织中K—ras基因突变的检测(2)
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本研究K-ras突变率为35.0%，与相关检测数据一致[10]，但本研究样本量较小，可能存在抽样误差，进一步大样本研究将有助于减少误差。本研究发现，K-ras突变以12、13密码子的Gly13Asp及Gly12Val突变为主，这与相关文献报道该试剂盒相关位点PCR扩增效率高，灵敏度高，反应低限可以达到1 copy/μL的检测结果相一致[11]。由于突变型K-ras基因患者不能从针对EGFR的靶向治疗中获益，因此，中国大肠癌患者靶向治疗前常规检测K-ras基因具有重要意义。本研究提示，K-ras基因突变与患者性别及肿瘤的分化程度有相关性，与既往一些研究结果一致[12]。未发现K-ras基因突变与年龄及肿瘤的病理学类型存在相关性，但也有研究发现K-ras突变与年龄及性别存在相关性[13]。国内大多数的相关研究采用的检测手段差异较大，从检测蛋白水平的免疫组织化学法到检测分子水平的PCR法，从传统的直接测序法到焦磷酸测序，从经典的PCR法到Real-Time PCR等，不同方法对样本的检测灵敏度相差甚远，检测灵敏度1%～50%，因而产生了不同的检测结果，得到了不同的统计数据和结论。
目前国内多采用Real-Time PCR及测序法对临床样本进行K-ras突变检测。测序法是国内大多数第三方检验机构所采用，该方法的优点是准确性较高，可以检测已知及未知突变，是检测的金标准，但由于该方法敏感性低，只有突变的肿瘤细胞大于50%方可检测，同时该方法运行成本大、耗时，特别是对于临床小穿刺活检组织难以检测，因而很难在医院开展。PCR法因其灵敏度高，速度快，特别是对于样本量较少的珍惜样本有较好的接测结果从而被广大得医院所采用，目前主要得检测方法有普通PCR、荧光定量PCR、高分辨率溶解度曲线法、ARMS法等等 ......
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