α平滑肌肌动蛋白红色荧光蛋白报告基因载体的构建及其在细胞中的表达(1)
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[摘要] 目的 构建α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体，为研究细胞内α-SMA的基因表达调控提供重要工具。 方法 克隆并构建含α-SMA启动子区的红色荧光报告质粒pDsRed-SMAp；用脂质体瞬时转染上皮细胞A549，观察α-SMA启动子对转化生长因子(TGF-β1)刺激的反应。 结果 酶切和DNA测序证明所构建的红色荧光蛋白报告基因载体是pDsRed-SMAp重组载体；该表达载体在上皮细胞静息状态下表达水平很低，经TGF-β1刺激后，在荧光显微镜下可看到高亮度的红色荧光。 结论 成功构建了α-SMA启动子驱动的红色荧光蛋白报告质粒pDsRed-SMAp，对生理相关刺激有很好的反应，可有效地用于α-SMA基因表达调控机制的研究。
[关键词] α平滑肌肌动蛋白；红色荧光蛋白；载体构建
[中图分类号] Q95-3；R563 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)06(a)-0007-03
特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibros，IPF)是一种慢性弥漫性肺间质疾患，发病原因不明，组织学表现为寻常型间质性肺炎(usual interstitial pneumonitis， UIP)[1]。IPF是最常见的特发性间质性肺病，预后差，生存中值只有4年[1-3]。IPF主要发病人群年龄为50～70岁，分布没有人种易感性，男性年发病率为7/10万，女性年发病率为11/10万[4]。IPF的组织学特征包括：肺泡上皮细胞不均一性的损伤活化、特征性的成纤维细胞灶存在和大量细胞外基质沉积[5]。虽然目前对其发病机制有一定的认识，但是其病因和具体的细胞分子机制还未明了 ......
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