针对HP450基因shRNA真核表达载体的质粒转染(1)

http://www.100md.com 2013年10月15日 中国医药导报2013年第29期

     [摘要] 目的 以pGPH1/GFP/Neo质粒为载体，构建特异性针对HP450基因shRNA真核表达载体，并通过脂质体介导转染正常的大鼠肝细胞株(BRL)，以探讨靶向干扰HP450基因对BRL细胞生长的影响。 方法 构建pGPH1/GFP/Neo-HP450真核表达载体。应用脂质体转染技术，将重组的pGPH1/GFP/Neo-HP450真核表达载体转染至大鼠肝细胞株(BRL)，并于转染后6、12、24 h在荧光倒置显微镜下观察细胞状态。 结果 成功构建针对HP450基因shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450，通过脂质体介导转染大鼠肝细胞株BRL，在荧光倒置显微镜下可观察到细胞转染后的荧光现象。 结论 成功构建的HP450 shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450，可通过质粒转染方法转染至BRL细胞。

    [关键词] HP450基因；质粒转染；BRL细胞株

    [中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)10(b)-0004-03

    原发性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一，过去尽管综合应用手术、放化疗等多种治疗手段，但患者生存率并无明显改善 ......
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    赖静 夏爱军 杨天燕 解放军第三〇三医院药剂科;广西医科大学;

    【摘要】目的以pGPH1/GFP/Neo质粒为载体,构建特异性针对HP450基因shRNA真核表达载体,并通过脂质体介导转染正常的大鼠肝细胞株(BRL),以探讨靶向干扰HP450基因对BRL细胞生长的影响。方法构建pGPH1/GFP/NeoHP450真核表达载体。应用脂质体转染技术,将重组的pGPH1/GFP/Neo-HP450真核表达载体转染至大鼠肝细胞株(BRL),并于转染后6、12、24 h在荧光倒置显微镜下观察细胞状态。结果成功构建针对HP450基因shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450,通过脂质体介导转染大鼠肝细胞株BRL,在荧光倒置显微镜下可观察到细胞转染后的荧光现象。结论成功构建的HP450 shRNA真核表达载体pGPH1/GFP/Neo-HP450,可通过质粒转染方法转染至BRL细胞。

    【关键词】 HP基因 质粒转染 BRL细胞株

    【基金】广西壮族自治区科学基金项目(项目编号:桂科自0991158)

    【分类号】R346

    原发性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,过去尽管综合应用手术、放化疗等多种治疗手段,但患者生存率并无明显改善,也未能从根本上解决肝癌转移和复发的问题[1]。随着分子生物学、细胞生物学等学科的飞速发展,肿瘤生物治疗越来越受到重视。抗组胺药敏感性细胞色素P450(简称HP450)主