1.2 骨髓采集

    在严格无菌条件下进行。连续硬膜外麻醉下，取双侧髂后上棘为穿刺点，左右各穿刺5次，共穿刺10次，每个穿刺点抽取骨髓20 mL，共200 mL。

    1.3 骨髓有核细胞分离和移植

    按骨髓/脐带血有核细胞体外分离试剂盒(宁夏中联达生物技术有限公司生产)说明分离骨髓有核细胞，制成50 mL左右的细胞悬液，计数细胞总量并流式细胞仪测定CD34细胞含量。本组单次移植提取的单个核细胞总量为(0.95～2.31)×109个，平均1.78×109个，其中CD34细胞含量为0.5%～1.2%。

    1.4 移植方法

    患者均为第1次接受干细胞移植治疗。取溃烂部位及患侧腓肠肌为主要注射部位，每点间隔2 cm，每点注射约1 mL细胞悬液，共注射约30点。病变轻侧或非患侧腓肠肌为次要注射部位，每个注射点间隔3 cm，每点注射约1 mL细胞悬液，共注射约20个点。肌内注射深度为皮下1～2 cm，注意避开血管。注射结束后卧床休息6 h，术后观察患者一般情况。

    1.5 治疗方法和观察指标

    每日常规换药 ......