重组人BMP—2诱导C3H10T1/2间质干细胞定向成骨分化早期基因表达谱分析(2)
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成骨细胞主要由骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)分化而来，在其发育分化的整个过程中，不同的基因严格按照特定的时间顺序开启和关闭，表现为与分化的阶段相一致，支持并且控制着成骨细胞的分化与成熟。因此，骨髓间质干细胞定向成骨分化调控研究在国内外受到高度重视，促进间质干细胞成骨定向分化与成熟，将是治疗骨质疏松症的新的有效方法和手段。但是，目前关于间质干细胞早期成骨定向分化方面的调控机制尚未完全阐明。本实验室采用重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)诱导小鼠间质干细胞C3H10T1/2定向成骨分化细胞模型，采用小鼠全基因组芯片筛选鉴定差异表达基因谱并进行生物信息学分析，探讨rhBMP-2成骨分化调控的差异表达基因集，并进一步通过网络生物学分析，为探讨间质干细胞早期成骨定向分化提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
小鼠间质干细胞C3H10T1/2购自中国科学院上海细胞库。rhBMP-2(R&D systems)，ArraySTAR mouse lncRNA microarray(8×60 K，上海康成生物，芯片包含31423条蛋白编码mRNA和25376条lncRNA，本文仅分析编码蛋白mRNA表达变化)。BCIP/NBT 碱性磷酸酶染色试剂盒(Sigma)。
1.2 实验方法
1.2.1 碱性磷酸酶染色鉴定早期成骨定向分化 C3H10T1/2接种于6孔板中，细胞生长至约90%融合，rhBMP-2诱导组加入含200 ng/mL rhBMP-2培养基，对照组加入不含rhBMP-2的培养基 ......
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