小分子NEK2干扰RNA对肺癌细胞耐药的研究(1)
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[摘要] 目的 探讨小分子NEK2干扰RNA(siRNA-NEK2)逆转人肺癌耐药细胞(A549/DDP)耐药性的研究。 方法 应用Real-time PCR法及Western blot法验证NEK2基因在人肺腺癌耐药细胞系(A549/DDP)细胞系呈现高表达；并采用脂质体为转染介质，将NEK2小片段RNA导入A549/DDP细胞沉默NEK2基因；应用MTT法观察顺铂、阿霉素对沉默NEK2基因后的A549/DDP细胞的细胞毒活性变化。 结果 NEK2-mRNA、NEK2蛋白在A549/DDP细胞系表达水平均显著高于A549细胞系，差异有统计学意义(P < 0.05)；顺铂、阿霉素对A549/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)分别是(53.08±0.56)、(8.09±0.31)μg/mL，对siRNA-control A549/DDP细胞的IC50分别是(53.09±0.78)、(8.10±0.98)μg/mL，而对siRNA-NEK2 A549/DDP细胞的IC50有显著下降，其值分别是(18.59±0.10)、(2.30±0.14)μg/mL，两组比较，差异均有统计学意义(P < 0.05)。 结论 小分子NEK2干扰RNA沉默NEK2可以提高耐药的肺癌细胞对化疗药物的敏感性。NEK2可能成为逆转肺癌耐药的一个新的靶点。
[关键词] 肺癌；细胞耐药；NEK2；siRNA-NEK2
[中图分类号] R563 ......
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陈永锋 王海晶 刘丁瑗 周向东 第三军医大学西南医院呼吸科;解放军
【摘要】目的探讨小分子NEK2干扰RNA(siRNA-NEK2)逆转人肺癌耐药细胞(A549/DDP)耐药性的研究。方法应用Real-time PCR法及Western blot法验证NEK2基因在人肺腺癌耐药细胞系(A549/DDP)细胞系呈现高表达;并采用脂质体为转染介质,将NEK2小片段RNA导入A549/DDP细胞沉默NEK2基因;应用MTT法观察顺铂、阿霉素对沉默NEK2基因后的A549/DDP细胞的细胞毒活性变化。结果 NEK2-mRNA、NEK2蛋白在A549/DDP细胞系表达水平均显著高于A549细胞系,差异有统计学意义(P0.05);顺铂、阿霉素对A549/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)分别是(53.08±0.56)、(8.09±0.31)μg/mL,对siRNA-control A549/DDP细胞的IC50分别是(53.09±0.78)、(8.10±0.98)μg/mL,而对siRNA-NEK2 A549/DDP细胞的IC50有显著下降,其值分别是(18.59±0.10)、(2.30±0.14)μg/mL,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论小分子NEK2干扰RNA沉默NEK2可以提高耐药的肺癌细胞对化疗药物的敏感性。NEK2可能成为逆转肺癌耐药的一个新的靶点。
【关键词】 肺癌 细胞耐药 NEK siRNA-NEK
【分类号】R734.2
肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人类健康,已成为世界上死亡率第一位的恶性肿瘤。约80%的患者就诊时已属晚期,化疗成为其主要治疗手段,而肺癌耐药现象的产生是影响化疗效果的重要原因。已有研究表明,肿瘤细胞耐药的分子机制极其复杂,除了进入肿瘤细胞内的药物浓度减
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