α干扰素增强骨肉瘤细胞对依托泊苷敏感性的实验研究(2)

http://www.100md.com 2014年3月5日 黄秀芳 原向伟

第1页

    参见附件。

     1 材料与方法

    1.1 细胞培养

    人骨肉瘤细胞U2OS(p53基因野生型)和MG63(p53基因突变型)购自中山大学病理教研室，培养液为DMEM(GIBCO产品)，其中含10%胎牛血清(GIBCO产品)、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素，培养于37℃的5%CO2培养箱(Forma，美国)。

    1.2 药物处理

    IFN-α购自Peprotech公司，批号300-02A，Etoposide购自Sigma公司，批号E1383，稀释分装冻存-20℃，使用时采用DMEM培养液稀释成工作浓度，处理分为四组：对照组(加入与等量于其余组的DMEM培养液)、IFN-α(加入含工作浓度药物的DMEM培养液使终浓度为5000 U/mL)组，Etoposide(终浓度在U2OS细胞为2.5 μg/mL、MG63细胞为0.625 μg/mL)组和IFN-α+Etoposide(终浓度同上)组。

    1.3 流式细胞术检测

    细胞经处理后，消化离心，收集细胞；PBS洗两次，离心；70%乙醇固定过夜；细胞经10 μmol/L的碘化丙啶(PI)染色5 min，4℃避光30 min；上FCM流式细胞仪(BD，美国)用488 nm激发光检测细胞DNA含量，LYSIS软件分析凋亡率。

    1.4 DNA Ladder检测

    细胞经各处理后，消化离心，收集细胞；PBS洗两次；加入0 ......

    http://www.100md.com/html/paper/1673-0089/2014/07/01-1.htm

您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。