丹皮酚对结肠癌细胞系LoVo细胞增殖、凋亡的影响及其机制(2)
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[Key words] Paeonol； LoVo cell； Ca2+； RUNX-3
研究表明，非甾体类消炎药(non-steroid anti-inflammatory drugs，NSAIDs)能降低结肠癌的发生，减少家族性结肠息肉患者息肉数量和大小，并能预防结肠腺瘤的复发[1]。本室前期研究显示[2]乙酰水杨酸能抑制结肠癌细胞系环氧合酶-2(COX-2)表达而抑制生长，并诱导细胞凋亡。但临床研究表明长期应用NSAIDs可引起胃溃疡甚至胃出血及一系列心血管不良反应，限制了其在临床上的广泛应用。因此寻找毒性小，而又能有效的抑制COX-2的抑制剂，是大肠癌化学预防的重要课题。
丹皮酚具有与非甾体类抗炎药相似的药理作用，包括解热镇痛、抗炎、免疫调节、抑制血小板聚集、抗血栓形成和中枢抑制作用等，且其副作用小。课题组前期[3-5]观察了丹皮酚对大肠癌HT-29细胞凋亡及凋亡相关基因的影响，发现丹皮酚可抑制大肠癌细胞的增殖生长，调节凋亡相关基因如Bcl-2、Bax、Fas及p53等的表达，且丹皮酚能够影响肿瘤细胞的生长周期，并与5-Fu具有协同作用。丹皮酚与非甾体类抗炎药均能有效下调COX-2的表达量，从而发挥抗肿瘤作用。本研究在此基础上进一步探讨了丹皮酚对人结肠癌LoVo细胞内Ca2+含量及RUNX-3基因的影响。
1 资料与方法
1.1细胞及试剂
人结肠癌细胞系LoVo细胞购于中国科学院上海细胞库；丹皮酚注射液购于宁波天真制药有限公司，纯度≥99.9%；AnnexinV/PI试剂盒购于BENDER公司；CCK-8试剂盒购自碧云天生物技术研究所；胎牛血清、DMEM/F12培养基、DEPC购于杭州四季青生物材料研究所；Fluo-3/AM购于日本同仁化学研究所；Trizol试剂、DEPC、异丙醇、氯仿、RT-PCR试剂盒等购于武汉谷歌生物技术有限公司；RUNX-3单克隆抗体购自Cell Signaling Technology公司；辣根酶标记兔抗山羊IgG购自武汉博士德生物科技有限公司 ......
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