酶联免疫斑点试验诊断结核性胸膜炎的临床应用价值(2)
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1 资料与方法
1.1 一般资料
将2011年8月~2012年8月武汉市医疗救治中心(以下简称“我中心”)收治的21例结核性胸膜炎患者作为结核组,其中男13例,女8例,年龄为20~70岁,平均(40.0±5.5)岁。所有患者均符合以下诊断标准[1]:①有胸痛,胸闷,发热典型症状;②胸腔积液常规生化等检查提示为渗出液,结核抗体阳性,细胞学检查以淋巴细胞为主;③胸水涂片发现抗酸杆菌;④胸膜活检病理组织学检查提示肉芽肿或干酪病变;⑤初治抗结核方案治疗后症状好转,胸水吸收较明显。将我中心同期收治的18例肺癌胸膜转移患者作为恶性肿瘤组,男10例,女8例,年龄40~78岁,平均(59.0±4.5)岁。所有患者均经临床表现、胸液检查、影像学检查、病理组织学或细胞学确诊,两组性别、年龄一般资料比较,差异均无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。本研究经我中心伦理委员会通过,患者均知情同意并签署知情同意书。
1.2 实验方法
1.2.1 胸水中单个核细胞的提取及冻存 用无菌方法采集100 mL胸水,室温,1800 r/min(r = 5 cm),15 min离心得沉淀物。用等体积的无菌PBS或生理盐水重悬,混匀。用移液管加至装有等体积的淋巴细胞分离液(Ficoll淋巴细胞分离液,深圳达科为生物技术有限公司)的15 mL离心管内,室温2300 r/min(r = 5 cm),30 min离心,用移液管小心吸取单个核细胞层至50 mL离心管,用40 mL的PBS或生理盐水洗涤,室温,1500 r/min(r = 5 cm),10 min离心得沉淀。所有患者于采集标本前均未给予免疫抑制治疗。
1.2.2 ELISPOT检测 按照结核杆菌感染T细胞酶联免疫斑点诊断试剂盒(深圳达科为生物技术有限公司)说明书 ......
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