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编号:12708166
葛花急性毒性及遗传毒性试验研究(2)
http://www.100md.com 2014年3月25日 关则婷 叶小忠 梁群欢 等
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    参见附件。

     蒸馏水,0.103 mPa 20 min灭菌。

    1.7 检测仪器

    DT1000电子天平、PSH-200生化培养箱、E412、HH.W21.600电热恒温水温箱、S-325型自动高压灭菌器、BSC-1360ⅡA2生物安全柜、Olympus CH显微镜、TBS124S电子天平、Olympus CX21FS1显微镜。 2 方法

    葛花符合《食品安全性毒理学评价程序》中新资源食品(在我国新发现、新研制或新引进的无食用习惯或仅在个别地区有食用习惯的食品或食品原料)的定义[8],根据该评价程序的要求,本研究选择进行第一阶段急性毒性试验和第二阶段遗传毒性试验。

    2.1 急性毒性实验

    急性毒性试验选用最大耐受剂量(MTD)法[9],该法适宜条件为有关资料显示毒性极小的或未显示毒性的受试样品,给予动物最大使用浓度和最大灌胃容量时,仍不出现死亡。选取18~22 g健康ICR小鼠共20只,雌雄各半数。试验前试验小鼠隔夜禁食16 h,不禁水。受试样品剂量设为30 g/kg BW,采用灌胃方式提供样品,灌胃容量设定为0.02 mL/g BW,24 h内灌胃3次。灌胃后,观察小鼠连续14 d,并记录小鼠中毒表现和死亡具体情况。

    2.2 遗传毒性试验

    2.2.1 鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)

    2.2.1.1 Ames试验是遗传毒性试验的首选。鼠伤寒沙门菌的突变型(即组氨酸缺陷型)菌株在没有组氨酸的培养基上不能够生长,在有组氨酸的培养基上能够正常生长。但如果在没有组氨酸的培养基中存在致突变物时,则沙门菌的突变型菌株可回复突变为野生型(表现型),因此在没有组氨酸培养基上也可以生长,这样可以根据菌落形成的数量 ......

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