中心组合设计—响应面分析法优选黄芩中黄芩苷的超声提取工艺(2)
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2.1.2 对照品溶液的制备 称取黄芩苷对照品10 mg,加甲醇定容至10 mL,得到质量浓度为1 mg/mL的标准对照品溶液,0.45 μm微孔滤膜滤过,备用。
2.1.3 供试品溶液的制备 取样品0.5 g,精密称定。按一定的液固比加入乙醇-水溶液,超声提取一定时间次数,取适量0.45 μm微孔滤膜,取续滤液,即得。
2.1.4 含量测定 取对照品溶液与供试品溶液各20 μL,按既定的方法测定,计算黄芩苷含量,色谱见图1。
图1 对照品(A)和样品(B)的HPLC色谱图
2.2 试验设计
2.2.1 单因素试验考察 在工艺条件优化方面,本文选择了乙醇浓度、超声提取时间、液固比及提取次数四个单因素对黄芩苷提取率的影响。
2.2.2 中心组合设计 为了得到最佳的提取工艺,分析参数影响因素,各因素及其之间交互作用对提取率的影响,在单因素试验结果基础之上,以黄芩苷提取率为考察指标,进行中心组合设计。中心组合设计各因素水平及中心组合设计见表1、2,并依据表2进行17次试验。
2.2.3 数据统计分析 采用SAS软件对试验结果进行响应面分析,建立数学模型,采用岭脊分析优化试验工艺条件,ORIGIN软件进行作图分析。
3 结果
3.1 单因素试验
3.1.1 提取次数对黄芩苷提取率的影响 在实验前期过程中,考虑了提取次数这一因素。然而,将已超声提取过的药渣再次进行超声提取,其黄芩苷含量仅为0.22%,固未选定提取次数作为单因素 ......
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