黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用(3)
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2.4 黑青稞籽皮提取物对Bcl-2,Bax蛋白表达的影响
和C组比较,缺氧/复氧损伤的细胞Bcl-2表达出现明显下降,各剂量给药组细胞Bcl-2表达低于C组,但明显高于H/R组,其中150 mg/L剂量组Bcl-2表达最高,300 mg/L剂量组次之。而Bax蛋白在各组中均没有出现明显的变化(图4)。
Bcl-2:B细胞淋巴瘤/白血病-2基因;Bax:Bcl-2相关X蛋白; CAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶
图4 各组细胞Bcl-2家族蛋白表达的水平
2.5 黑青稞籽皮提取物对Akt表达的影响
磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Akt)信号通路具有调控细胞代谢、增殖和凋亡的作用,尤其与细胞凋亡的线粒体调控关系密切。Western blotting结果显示,各组中总丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(tAkt)蛋白的表达无显著变化;而H/R组pAkt蛋白表达显著降低,黑青稞籽皮提取物处理后,各剂量组pAkt表达仍低于C组,但较H/R显著升高(图5)。说明缺氧/复氧对tAkt表达无明显影响,但对pAkt具有抑制作用,黑青稞籽皮提取物可能具有重新激活该通路的作用。
tAkt:总丝氨酸苏氨酸蛋白激酶;pAkt:磷酸丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶;CAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶
图5 各组细胞Akt及Pakt蛋白表达的水平
3 讨论
心肌细胞的缺氧/复氧损伤与缺血再灌注损伤具有极为相似的病理生理机制。缺血再灌注损伤的发生机制涉及到线粒体跨膜电位下降、氧自由基生成、细胞凋亡等。线粒体跨膜电位下降和膜通透性改变导致线粒体内物质转移至胞浆中,引发系列凋亡过程,线粒体解联的呼吸链会产生大量活性氧,而大量的活性氧可以氧化线粒体内膜上的心磷脂,加重线粒体解联,二者相互作用,促进细胞凋亡[5]。ROS是心肌缺血再灌注损伤的主要启动子之一,当凋亡启动后 ......
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