表没食子儿茶素没食子酸酯对人宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡及bcl—2/bax表达的影响
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2014年8月25日
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秦婧 洪莉 武汉大学人民医院妇二科;
【摘要】目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法体外培养HeLa细胞,分为对照组和实验组,实验组用不同浓度的EGCG处理24、48、72 h,对照组加入等体积的培养基。采用MTT法测定EGCG对HeLa细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;EGCG(浓度分别为20、40、80μg/mL)处理HeLa细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期、分光光度计检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Casepase-3)相对活性、Western blot法检测bcl-2/bax蛋白表达情况。结果 EGCG(浓度10~100μg/mL)能抑制HeLa细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;浓度为20、40、80μg/mL的EGCG作用HeLa细胞48 h后,细胞凋亡率逐渐上升,分别为12.4%、23.4%、35.4%,明显高于对照组(3.3%);细胞周期结果显示EGCG能抑制细胞的G1期行进和G1/S转换,降低S期细胞比例;实验组HeLa细胞Caspase-3相对活性分别为(1.36±0.07)、(1.85±0.06)、(2.45±0.07),均高于对照组(0.93±0.06),差异均有统计学意义(P0.05);bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,呈剂量依赖性。结论EGCG能抑制HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞Casepase-3活性、下调bcl-2基因的表达及上调bax基因有关。EGCG是一种前景广阔的抗肿瘤药物。
【关键词】 表没食子儿茶素没食子酸酯 HeLa 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
【基金】湖北省自然科学基金面上项目(编号2010CDB06903)
【分类号】R285
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,其在全球恶性肿瘤中发病率高居第2位,病死率居第4位,而在发展中国家其发病率和病死率均高居第2位,全球每年有超过25万患者死于宫颈癌[1]。近年来,宫颈癌发病率趋于年轻化,严重危害着妇女的健康。宫颈癌患者死亡的主要原因是肿瘤复发和转移。化疗药
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