黄芪多糖对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞数量和功能的影响(2)
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参见附件。
1.3.5 EPCs增殖功能检测 采用MTT法检测EPCs增殖能力。首先制备细胞悬液并计数,将等量的EPCs悬液接种于96孔板培养,每孔100 μL并加入MTT(5 g/L)20 μL,于细胞培养箱培养4 h。之后取出弃上清液,向每孔加入二甲基亚砜(DMSO)150 μL,于微量振荡器振荡10 min使结晶物充分溶解,然后置全自动酶标仪于波长490 nm处测定各孔吸收OD值,用于评价EPCs增殖能力。
1.4 统计学方法
采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析,计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验;以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 EPCs的鉴定
由分离获取的单个核细胞培养7 d后在显微镜下观察细胞呈梭型。通过共聚焦显微镜鉴定Dil-AcLDL(红色,激发波长为543 nm)和FITC-UEA-Ⅰ(绿色,激发波长为477 nm)双染色阳性(呈黄色)细胞即为正在分化的EPCs(图1,见封三),于倒置荧光显微镜下随机选择5个视野(倒置荧光显微镜,200×)进行计数并比较。
2.2 APS对T2DM患者cEPCs数量及黏附功能、迁移功能、增殖功能的影响
两组患者在治疗前cEPCs的数量及功能差异均无统计学意义(P > 0. 05);常规治疗组在治疗前后cEPCs的数量及功能无明显改变(P > 0.05);APS治疗组患者经过为期2周的疗程后,cEPCs的数量显著增加且cEPCs各功能均明显改善,与治疗前及常规治疗组治疗后比较 ......
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