小鼠卵胞浆内单精子显微注射改良技术在辅助生殖技术应用中的价值(2)
1 材料与方法
1.1 实验动物
实验动物清洁级昆明小鼠均购自广东省实验动物中心,其中4~6周龄雌鼠50只,8~12周龄雄鼠20只。
1.2 实验试剂及设备
孕马血清促性腺激素(PMSG)、注射用人绒毛膜促性腺激素(HCG)均购自宁波市三生药业有限公司。取卵-胚胎处理液(G-MOPS)、洗精受精液(IVF)、卵裂胚培养液(G-1)、囊胚培养液(G-2)均购自瑞典vitrolife公司。培养皿、吸管购自美国Falcon公司。设备:丹麦IVF tech工作站、奥林巴斯(型号:LSZX10)及尼康(型号:SMZ1000)解剖显微镜、奥林巴斯导致显微镜(型号IX71)、Apendorf显微操作系统、ASTEC三气培养箱、CO2气体检测仪、温度测定仪等。
1.3 实验方法
1.3.1 促排卵及卵子准备 选择4~6周龄雌性昆明小鼠,于17:00时腹腔注射PMSG 10 U,48 h后腹腔注射HCG 10 U,14~16 h后采集卵子。卵子准备具体步骤:①颈部脱臼处死昆明小鼠 ......
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1.1 实验动物
实验动物清洁级昆明小鼠均购自广东省实验动物中心,其中4~6周龄雌鼠50只,8~12周龄雄鼠20只。
1.2 实验试剂及设备
孕马血清促性腺激素(PMSG)、注射用人绒毛膜促性腺激素(HCG)均购自宁波市三生药业有限公司。取卵-胚胎处理液(G-MOPS)、洗精受精液(IVF)、卵裂胚培养液(G-1)、囊胚培养液(G-2)均购自瑞典vitrolife公司。培养皿、吸管购自美国Falcon公司。设备:丹麦IVF tech工作站、奥林巴斯(型号:LSZX10)及尼康(型号:SMZ1000)解剖显微镜、奥林巴斯导致显微镜(型号IX71)、Apendorf显微操作系统、ASTEC三气培养箱、CO2气体检测仪、温度测定仪等。
1.3 实验方法
1.3.1 促排卵及卵子准备 选择4~6周龄雌性昆明小鼠,于17:00时腹腔注射PMSG 10 U,48 h后腹腔注射HCG 10 U,14~16 h后采集卵子。卵子准备具体步骤:①颈部脱臼处死昆明小鼠 ......
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