石榴皮提取物中鞣花酸和没食子酸在大鼠体内的药代动力学研究(2)
2.1.3大孔吸附树脂富集纯化石榴皮总鞣质[10]
将制备得到的石榴皮鞣质粗提物冻干粉用蒸馏水溶解，配制成浓度为4.35 mg/mL上样液。取HPD-400型大孔吸附树脂25 g，湿法装柱，将石榴皮鞣质样品液以2 BV/h的流速上样吸附，上柱量为5 BV后(吸附柱中树脂装填量的倍数)。水洗除杂，然后用2 BV 70%乙醇洗脱后即可解吸完全，解吸率为93.94%，收集洗脱液，回收乙醇，经HPD-400树脂纯化后，磷钼钨酸-干酪素比色法测定鞣质含量，结果终产品中总鞣质的纯度为55.62%，减压干燥得到提取物的浸膏，冷冻干燥，4℃冰箱保存备用。
2.2 标准储液的制备
精密称取鞣花酸、没食子酸对照品1.74 mg于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解，即制得鞣花酸的标准储备液。
2.3 色谱条件
2.3.1 鞣花酸色谱柱
Venusil MP-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：0.2%磷酸-乙腈=77∶23；DAD检测波长：256 nm；流速：0.8 mL/min；柱温：40℃。
2.3.2 没食子酸色谱柱
Venusil MP-C18(4.6 mm×250 mm ......
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将制备得到的石榴皮鞣质粗提物冻干粉用蒸馏水溶解，配制成浓度为4.35 mg/mL上样液。取HPD-400型大孔吸附树脂25 g，湿法装柱，将石榴皮鞣质样品液以2 BV/h的流速上样吸附，上柱量为5 BV后(吸附柱中树脂装填量的倍数)。水洗除杂，然后用2 BV 70%乙醇洗脱后即可解吸完全，解吸率为93.94%，收集洗脱液，回收乙醇，经HPD-400树脂纯化后，磷钼钨酸-干酪素比色法测定鞣质含量，结果终产品中总鞣质的纯度为55.62%，减压干燥得到提取物的浸膏，冷冻干燥，4℃冰箱保存备用。
2.2 标准储液的制备
精密称取鞣花酸、没食子酸对照品1.74 mg于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解，即制得鞣花酸的标准储备液。
2.3 色谱条件
2.3.1 鞣花酸色谱柱
Venusil MP-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：0.2%磷酸-乙腈=77∶23；DAD检测波长：256 nm；流速：0.8 mL/min；柱温：40℃。
2.3.2 没食子酸色谱柱
Venusil MP-C18(4.6 mm×250 mm ......
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