幽门螺杆菌感染后儿童与成人胃黏膜免疫状态差异(2)
1.2.4 采用RT-PCR测定PPAR-γ 采用RNA fast 200试剂盒进行RNA的提取,按照上海研成生物科技有限公司的逆转录试剂盒合成cDNA,RT-PCR采用Bio-Rad公司的CFx96型PCR仪进行操作。通过Trizol一步法对总RNA进行提取,通过紫外分光光度计对RNA浓度和纯度进行测定,通过琼脂糖凝胶电泳进行完整性的鉴定。反转录反应总体系为20 μL,总RNA 6.0 μL,1.0 μL Oligo-dT 50 μg/mL、双蒸水5.5 μL、RNasin 40 U/μL加入剂量0.5 μL5×Buffer 4.0 μL,dNTP 10 mol/L剂量2.0 μL和1 μL。建立反应条件:70℃预热5 min,快速加入反转录酶,然后42℃ 60 min,95℃ 5 min,4℃ 5 min,反应后产物放在-20℃保存备检。通过定量PCR,测定不同标本中PPAR-γ表达量情况。
1.3 观察指标
分别比较成人与儿童Hp阴性组、成人与儿童Hp阳性组、成人Hp阳性组与Hp阴性组、儿童Hp阳性组与Hp阴性组的COX-2、NF-κB、PPAR-γ mRNA、IL-8及IL-2表达情况。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析,计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验;计数资料用率表示 ......
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1.3 观察指标
分别比较成人与儿童Hp阴性组、成人与儿童Hp阳性组、成人Hp阳性组与Hp阴性组、儿童Hp阳性组与Hp阴性组的COX-2、NF-κB、PPAR-γ mRNA、IL-8及IL-2表达情况。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析,计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验;计数资料用率表示 ......
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