中药多糖质量控制研究进展(2)
2.2 高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)
HPGPC是GPC和HPLC结合的产物，色谱柱有凝胶填料组成。多糖在凝胶色谱柱上洗脱时间(tR)和分子量大小成一定的关系，可先用已知分子量大小的葡聚糖作对照，得到一系列tR，绘制标准曲线，通过多糖样品的tR和标准曲线求得未知多糖样品的分子量大小[19-20]。和GPC相比，HPGPC分析时间更短，操作更加方便，重复性更好，结果可信度更高，但对仪器设备要求更高。由于糖类物质缺少发色团，HPGPC常用检测器有示差折光检测器和蒸发光散射检测器，两种检测器都是通用型检测器，但灵敏度相对紫外、荧光等检测器较差。HPGPC常用的商品化色谱柱有TOSOH TSK-Gel系列、Shodex色谱柱等。Yang等[21]采用HPGPC法测得龙眼肉中1种中性多糖LPS-N的分子量为13.8 kD，两种酸性多糖(LPS-A1和LPS-A2)分子量分别为1382 kD和571 kD。Sun等[22]用HPGPC法测得紫球藻中多糖分子量大小分别有2918.7、256.2、60.66、6.55 kD。Wang等[23]得到的一种绿茶中性多糖分子量通过HPGPC分析为21 247 D。可以说，HPGPC已经成为多糖分子量大小和分布范围测定的首选方法 ......
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HPGPC是GPC和HPLC结合的产物，色谱柱有凝胶填料组成。多糖在凝胶色谱柱上洗脱时间(tR)和分子量大小成一定的关系，可先用已知分子量大小的葡聚糖作对照，得到一系列tR，绘制标准曲线，通过多糖样品的tR和标准曲线求得未知多糖样品的分子量大小[19-20]。和GPC相比，HPGPC分析时间更短，操作更加方便，重复性更好，结果可信度更高，但对仪器设备要求更高。由于糖类物质缺少发色团，HPGPC常用检测器有示差折光检测器和蒸发光散射检测器，两种检测器都是通用型检测器，但灵敏度相对紫外、荧光等检测器较差。HPGPC常用的商品化色谱柱有TOSOH TSK-Gel系列、Shodex色谱柱等。Yang等[21]采用HPGPC法测得龙眼肉中1种中性多糖LPS-N的分子量为13.8 kD，两种酸性多糖(LPS-A1和LPS-A2)分子量分别为1382 kD和571 kD。Sun等[22]用HPGPC法测得紫球藻中多糖分子量大小分别有2918.7、256.2、60.66、6.55 kD。Wang等[23]得到的一种绿茶中性多糖分子量通过HPGPC分析为21 247 D。可以说，HPGPC已经成为多糖分子量大小和分布范围测定的首选方法 ......
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