贝伐单抗联合放疗对肺癌裸鼠移植瘤作用的研究(2)

http://www.100md.com 2015年5月15日 中国医药导报2015年第14期

     1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 动物及细胞株 24只3～4周龄的BALB/C(nu/nu)裸小鼠(SPF级，合格证号：44007200003832)购自广东省实验动物中心，雌雄各半，体重13～14 g，于广州医科大学动物实验中心SPF级层流柜内饲养；人肺癌细胞株A549由广州医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所提供。

    1.1.2 药物及主要试剂 贝伐单抗购自瑞士罗氏制药公司，100 mg/支；CD34兔单克隆抗体及VEGF小鼠单克隆抗体均购自美国Abcam公司；免疫组化试剂盒(PV6001/6002/6003)及DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

    1.1.3 放疗仪器 于中山大学肿瘤医院实验中心照射，RS 2000 X-线辐射仪，由Rad Source Technologies公司生产，电压为160 kV，电流25 mA，0.3 mm铜过滤，剂量率为623 cGy/min。

    1.2 方法

    1.2.1 肺癌细胞培养及肺癌裸鼠移植瘤动物模型建立 将人A549肺癌细胞置于含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基中 ......