单细胞聚团拟胚体形成诱导人多能干细胞造血分化的技术优化(3)
2.2 Spin-EB诱导造血分化后CD34+细胞的比例
将上述两种培养介质中形成的Spin-EB转入低吸附24孔板，并加入诱导造血分化的细胞因子组合，诱导分化培养5 d后，光学显微镜下观察分化EB的形态特征并收集EB消化为单细胞后流式分析CD34+细胞比例。结果显示，AggreWellTM800培养板中形成的Spin-EB中诱导造血分化后EB呈分化良好的三维囊状空泡，CD34+细胞的比例为22.6%(图2A)；V-96孔板形成的Spin-EB中，除3000个细胞/孔的EB中有部分分化良好的三维囊状空泡形态，6000、9000细胞/孔的EB均呈现为分化不良的实心结构。CD34+分析，3000个细胞/孔为10.8%、6000个细胞/孔为1.28%、9000个细胞/孔为1.23%(图2B～D)。
2.3 Spin-EB来源CD34+造血集落形成和红系分化能力
为证明上述Spin-EB来源的CD34+细胞具有造血分化能力 ......
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将上述两种培养介质中形成的Spin-EB转入低吸附24孔板，并加入诱导造血分化的细胞因子组合，诱导分化培养5 d后，光学显微镜下观察分化EB的形态特征并收集EB消化为单细胞后流式分析CD34+细胞比例。结果显示，AggreWellTM800培养板中形成的Spin-EB中诱导造血分化后EB呈分化良好的三维囊状空泡，CD34+细胞的比例为22.6%(图2A)；V-96孔板形成的Spin-EB中，除3000个细胞/孔的EB中有部分分化良好的三维囊状空泡形态，6000、9000细胞/孔的EB均呈现为分化不良的实心结构。CD34+分析，3000个细胞/孔为10.8%、6000个细胞/孔为1.28%、9000个细胞/孔为1.23%(图2B～D)。
2.3 Spin-EB来源CD34+造血集落形成和红系分化能力
为证明上述Spin-EB来源的CD34+细胞具有造血分化能力 ......
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