热预处理对小鼠创伤性脑损伤的神经保护作用(2)
1.2 方法1.2.1 HA方法 将小鼠暴露于38℃的动物实验舱内,2 h/d,不给食水,然后置于饲养环境中,连续刺激10 d。
1.2.2 TBI模型的建立 采用改良的自由落体撞击损伤装置建立小鼠TBI模型,具体方法:给小鼠腹腔注射10%(400 mg/kg)水合氯醛,麻醉起效后固定于鼠板上,碘酒消毒头皮,沿正中线从眼部至耳后切开并分离骨膜,暴露头骨。在冠状缝与人字缝连线中点向右3~5 mm处标记撞击点,使撞击杆从3 cm高处自由下落,使小鼠发生闭合性脑损伤。为防止呼吸抑制,术后立即将小鼠置于氧气箱中(20%O2+5%CO2)吸氧5 min,缝合头皮,置于25℃环境中复苏[3]。NT组和HA组不进行撞击,其余操作相同。
1.2.3 Fluoro Jade B(FJB)染色过程 FJB是一种荧光染料,与变性神经元的亲和力强,被认为是特异性标志变性神经元的有效方法。染色过程:经相应组别处理后的小鼠经4%多聚甲醛灌注固定,取脑组织进行冰冻切片,晾干后进行FJB染色及观察 ......
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