1.6.5 总RNA提取

    用预冷的DEPC水1 mL清洗白色念珠菌，置于1.5 mL EP管中，加入1 mL Trizol，静置5 min；加入0.2 mL氯仿，盖紧EP管，上下倾倒15 s，室温静置2～3 min，4℃ 12 000 r/min离心15 min，取上清；加入0.5 mL异丙醇，-20℃放置1 h，4℃ 12 000 r/min离心10 min，弃上清；75%乙醇洗2次，4℃ 12000 r/min离心5 min，弃上清，吸取残存乙醇；无菌台干燥5～10 min，加DEPC水溶解，-80℃保存备用。

    1.6.6 RNA纯度检测

    应用紫外分光光度计检测RNA纯度，分别测定260 nm和280 nm波长下RNA的吸光度，计算A260/A280，若比值在1.8～2.0之间则提示RNA质量较好。

    1.6.7 逆转录反应

    反应体系为5×逆转录buffer 2 μL、RNA酶抑制剂0.5 μL、dNTP 2 μL、RNase free dH2O 7.5 μL、OligodT 1 μL、Mgcl2 4 μL、AMV反转录酶 1 μL、RNA模板2 μL ......