人多巴胺D2基因启动子区—350A/G多态位点荧光素酶表达载体的构建与鉴定及活性检测(1)
人多巴胺D2基因启动子区—350A,G多态位点荧光素酶表达载体的构建与鉴定及活性检测,多巴胺受体D2,单核苷酸多态性,荧光素酶活性
[摘要] 目的 探讨人多巴胺D2(DRD2)基因启动子区-350 bp位点单核苷酸多态性(rs1799978)对DRD2基因转录活性的影响，为进一步揭示DRD2基因启动子区单核苷酸多态性的功能及其对创伤应激障碍综合征易患性的分子机制奠定基础。 方法 以人全血基因组DNA为模板，分别扩增DRD2基因启动子区-350 bp处分别为A或G的目的片段(-1000 bp～+168 bp)，与经过改建的报告基因空载体pmirGlo-promoter相连接，构建启动子区-350 bp处分别为A和G的重组荧光素酶报告基因表达载体，并通过限制性内切酶双酶切及测序进行鉴定，然后将构建好并经过鉴定的表达载体pmirGlo-promoter-A和pmirGlo-promoter-G分别与pRL-CMV瞬时共转染人胚肾癌细胞株HEK293 ......
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