1 材料与方法

    1.1 miR-96慢病毒质粒构建与包装

    实验所需重组穿梭质粒LV3和包装质粒均由上海吉玛制药技术有限公司制备。LV3质粒携带荧光蛋白表达基因及嘌呤霉素抗性基因。miR-96基因片段的导入及病毒包装由上海吉玛制药技术有限公司完成。基因片段序列分别如下。miR-96：5′-TTGTGCTTGATCTAACCATGT-3′；阴性对照：5′-TTCTCCGAACGTGTCACGTTTC-3′。经基因测序确定序列导入成功。

    1.2 细胞培养

    前列腺癌细胞株：DU-145(购自中科院上海细胞库)，用含10%胎牛血清、1%青霉素和链霉素的RPMI 1640培养基，按常规方法培养及传代。胎牛血清(Gibco)、青霉素和链霉素(北京索莱宝科技有限公司)；1640培养基(Gibco)、0.25%胰蛋白酶(北京索莱宝科技有限公司)；嘌呤霉素粉剂(北京索莱宝科技有限公司)；普通显微镜及荧光显微镜(日本Olympus)；荧光定量PCR仪(日本Olympus) ......