TTA1—Tat—PEG—GS NPs结合siRNA—EGFR转染C6细胞抑制EGFR基因表达的研究(3)
1.2.6 CCK-8实验检测C6细胞增殖能力 转染48 h后，分别消化收集各组细胞，调整密度至5×104细胞/mL，各取100 μL细胞悬液/孔加入到5个96孔板中，每组设3个复孔。24 h后，取出1个96孔板，往每孔中加入10 μL CCK8试剂，37℃培养箱中继续培养4 h，用酶标仪测定450 nm处吸光值。每隔24 h采用同样的方法取1个96孔板检测，连续测5 d。1.2.7 流式细胞术检测C6细胞的凋亡 转染48 h后，分别消化收集各组细胞，调整密度至1×106细胞/mL，取0.5 mL细胞悬液，室温1200 r/min离心3 min，去上清后再用200 μL预冷的1×结合缓冲液轻轻重悬。加入10 μL AnnexinV-FITC，室温避光反应15 min，室温1000 r/min离心5 min，洗涤1次，用500 μL 1×结合缓冲液重悬细胞 ......
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