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编号:12858919
C多态性与肺癌易感性探讨> Reprimo基因3非翻译区839位点G>C多态性与肺癌易感性(2)
http://www.100md.com 2016年3月25日 《中国医药导报》 2016年第9期
     1.2.2 扩增试剂 采用TaKaRa的MightyAmp DNA Polymerase试剂进行扩增Reprimo基因,引物由上海生工生物工程有限公司合成,碱基序列为R1:5'-GCGCAGAACTTTGGAAGCTGC-3',R2:5'-GCGCAGAACTTT GGAAGCTGG-3',R3:5'-AGGAGAAGAGTGGGAGCG C-3';R1R3负责839位点的G片段,扩增产物为235 bp;R2R3负责839位点的C片段,扩增产物为235 bp。

    1.2.3 PCR反应体系 25 μL反应体系:2×PCR Buffer 12.5 μL,模板DNA 4 μL,酶(5 U/μL)0.5 μL,引物0.5 μL×2,重蒸水7 μL。体系反应条件:98℃预变性5 min,扩增温度98℃ 10 s、60℃ 1 s、68℃ 1 min,扩增循环40次,68℃延伸4 min;选取10 μL PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳,检测扩增目的基因 ......
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